Een contrast van drie inentingstechnieken die worden gebruikt om het ras van onbekend Fusarium oxysporum f.sp. te bepalen. niveum Isolaten

Summary

Het beheren van Fusarium-verwelking van watermeloen vereist kennis van de aanwezige pathogene rassen. Hier beschrijven we de worteldip, aangetaste kernel seeding en gemodificeerde tray-dip inentingsmethoden om hun werkzaamheid aan te tonen bij rastypering van de pathogene schimmel Fusarium oxysporum f. sp niveum (Fon).

Abstract

Fusarium verwelking van watermeloen (Citrullus lanatus), veroorzaakt door Fusarium oxysporum f. sp. niveum (Fon), is opnieuw opgedoken als een belangrijke productiebeperking in het zuidoosten van de VS, vooral in Florida. De inzet van geïntegreerde plaagbestrijdingsstrategieën, zoals rasspecifieke resistente cultivars, vereist informatie over de diversiteit en bevolkingsdichtheid van de ziekteverwekker op de velden van telers. Ondanks enige vooruitgang in de ontwikkeling van moleculaire diagnostische hulpmiddelen om pathogene isolaten te identificeren, vereist rasbepaling vaak bioassay-benaderingen.

Rastypering werd uitgevoerd door worteldipinenting, besmette kernelzaaimethode en de gemodificeerde tray-dip-methode met elk van de vier watermeloenverschillen (Black Diamond, Charleston Grey, Calhoun Grey, Plant Introduction 296341-FR). Isolaten krijgen een rasaanduiding toegewezen door berekening van de ziekte-incidentie vijf weken na inenting. Als minder dan 33% van de planten voor een bepaalde cultivar symptomatisch was, werden ze gecategoriseerd als resistent. De cultivars met een incidentie van meer dan 33% werden als vatbaar beschouwd. Dit artikel beschrijft drie verschillende methoden van inenting om ras, worteldip, besmette kernel en gemodificeerde tray-dip inenting vast te stellen, waarvan de toepassingen variëren afhankelijk van het experimentele ontwerp.

Introduction

De bodemschimmels die deel uitmaken van het Fusarium oxysporum species complex (FOSC) zijn impactvolle hemibiotrofe plantpathogenen die ernstige ziekten en opbrengstverlies kunnen veroorzaken in een breed scala van gewassen¹. Fusarium verwelking van watermeloen, veroorzaakt door F. oxysporum f. sp. niveum (Fon), is de afgelopen decennia over de hele wereld toegenomen in omvang, incidentie en ernst ^2,3. Bij zaailingen lijken de symptomen van Fusarium-verwelking vaak op demping. Bij oudere planten wordt het gebladerte grijs, chlorotisch en necrotisch. U....

Protocol

1. Ras bepalen met root-dip methode (RDM)

1. Voorbereiding van de experimentele omgeving
   1. Omdat symptoomexpressie sterk afhankelijk is van omgevingsomstandigheden, moet u planten in een gecontroleerd gebied houden. Controleer de relatieve vochtigheid, temperatuur, fotoperiode en lichtintensiteit (figuur 1).
      1. Stel de temperatuur in op 26-28 °C, de relatieve vochtigheid op 50-75% en stel een fotoperiode van 16 uur in om voldoende plantengroei en gezondhei.......

Discussion

Er zijn drie methoden voor rastypering gepresenteerd. Elk van deze methoden is het meest geschikt voor specifieke vragen en experimentele omstandigheden. De infestatiemethode voor aangetaste pitten (bodeminfestatie) is misschien eenvoudiger en eenvoudiger, waardoor het vooral nuttig is voor de beoordeling van pathogeniciteit³⁰. Het gebruik van deze methode voor eenvoudige race-typering is zeer effectief. Het toepassen van de methode om de resistentie van een specifieke cultivar te bepalen kan echt.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
100% Fuller’s Earth	Sigma-Aldrich	F200-5KG
1 L glass Erlenmeyer Flask	PYREX	4980-1L
15 mL falcon tubes	Fisher Scientific	14-959-49B
50 mL graduated cylinder	Lab Safety Supply	41121805
50 mL Eppendorf Conical Tubes	Fisher Scientific	05-413-921
Aluminum foil wrap	Reynolds Wrap	720
Bleach	Walmart	587192290
Bunsen burner	Fisher Scientific	03-391-301
CaCO3	sigma-Aldrich	239216
cell spreaders	Fisher Scientific	08-100-11
Cheesecloth	Lions Services, Inc	8305-01-125-0725
Clear plastic dishes	Visions Wave	999RP6CLSS	~15 cm diameter
Clear vinyl tubing for mushroom bag clamps	Shroom Supply		6" for small bag, 8" for medium bag, 10" for large bag
Cotton Balls	Fisherbrand	22-456-885	Sterile
Ethanol	Fisher Chemical	A4094	100%, then combine with water to make 70% for use
Flourescent Tube Lights	MaxLume	Model T5	2800 K Color Temperature, 24'' or 48'' long
granulated agar	VWR International	90000-786
Hand-held Spray Bottle	Ability One	24122002	~0.95 L
hemacytometer	Fisher Scientific	02-671-55A	Two chamber hemacytometer
Lab trays	Fisher Scientific	15-236-2A
Large, sealable plastic bags	Ziploc	430805	38 cm x 38 cm
Mister / watering can	Bar5F	B10H22
Mushroom Bag Clamp	Shroom Supply		6" for small bag, 8" for medium bag, 10" for large bag
Nitrile Gloves	Fisher Scientific	19-130-1597D
Organic Rye Berries	Shroom Supply		0.5 gallon or 25 lb bags
P1000 pipette and tips	Fisher Scientific	14-388-100
Petri dishes	Fisherbrand	FB0875713	Round, 100 mm diameter, 15 mm height
Planting media	Jolly Gardener	Pro-Line C/B
Plastic Pitcher	BrandTech	UX0600850	1 L or larger
Plastic planting pots	Neo/SCI	01-1177	~15 cm diameter and ~10 cm height
Plastic, autoclave-safe bin	Thermo Scientific	UX0601022	3 L
Quarter-strength potato dextrose agar media	Cole-Parmer	UX1420028	Use powder in combination with recipe for QPDA
Scientific Balance Scale, measuring in g	Ohaus	30208458	Any precise scale that can hold and measure 200g will work
Size #4 cork bore	Cole-Parmer	NC9585352
Small Mushroom grow bag	Shroom Supply		0.5 micron filter, also comes in medium and large sizes
Soil trowel	Walmart	563876946
Styrofoam flats (6 x 12 cells)	Speedling	Model TR72A
Styrofoam flats (8 x 16 cells)	Speedling	Model TR128A
Syringe (5 or 10 mL)	fisher Scientific	14-829-19C
Timer	Walmart	TM-01
V8 Original 100% Vegetable Juice	Walmart	564638212
vortex	Fisher Scientific	02-215-418
Watermelon Seed - Black Diamond	Willhite Seed Inc	17
Watermelon Seed - Calhoun Gray	Holmes Seed Company	4440
Watermelon Seed - Charleston Gray	Bonnie Plants	7.15339E+11
Watermelon Seed - PI 296341-FR	Contact authors	Contact authors
Wheat Kernels (Maxie var.) (optional)	Alachua County Feed & Seed