अज्ञात Fusarium oxysporum f.sp की दौड़ निर्धारित करने के लिए उपयोग की जाने वाली तीन इनोक्यूलेशन तकनीकों का एक विपरीत। निवेम आइसोलेट्स

Summary

तरबूज के फुसेरियम विल्ट के प्रबंधन के लिए मौजूद रोगज़नक़ दौड़ के ज्ञान की आवश्यकता होती है। यहां, हम रूट-डुबकी, संक्रमित कर्नेल सीडिंग, और संशोधित ट्रे-डिप इनोक्यूलेशन विधियों का वर्णन करते हैं ताकि रोगजनक कवक फुसेरियम ऑक्सीस्पोरम एफ एसपी निवम (एफओएन) की दौड़-टाइपिंग में उनकी प्रभावकारिता का प्रदर्शन किया जा सके।

Abstract

तरबूज (Citrullus lanatus) के Fusarium wilt, Fusarium oxysporum f. sp. niveum (Fon) के कारण, दक्षिण-पूर्वी संयुक्त राज्य अमेरिका में एक प्रमुख उत्पादन बाधा के रूप में फिर से उभरा है, विशेष रूप से फ्लोरिडा में। एकीकृत कीट प्रबंधन रणनीतियों की तैनाती, जैसे कि दौड़-विशिष्ट प्रतिरोधी cultivars, उत्पादकों के क्षेत्रों में रोगज़नक़ की विविधता और जनसंख्या घनत्व पर जानकारी की आवश्यकता होती है। रोगज़नक़ आइसोलेट्स की पहचान करने के लिए आणविक नैदानिक उपकरण विकसित करने में कुछ प्रगति के बावजूद, दौड़ निर्धारण के लिए अक्सर बायोएसे दृष्टिकोण की आवश्यकता होती है।

रेस टाइपिंग रूट-डिप इनोक्यूलेशन, संक्रमित कर्नेल सीडिंग विधि, और चार तरबूज अंतर (ब्लैक डायमंड, चार्ल्सटन ग्रे, कैलहॉन ग्रे, प्लांट इंट्रोडक्शन 296341-एफआर) में से प्रत्येक के साथ संशोधित ट्रे-डुबकी विधि द्वारा आयोजित की गई थी। आइसोलेट्स को टीकाकरण के पांच सप्ताह बाद रोग की घटनाओं की गणना करके एक दौड़ पदनाम सौंपा जाता है। यदि किसी विशेष किस्म के लिए 33% से कम पौधे रोगसूचक थे, तो उन्हें प्रतिरोधी के रूप में वर्गीकृत किया गया था। 33% से अधिक घटनाओं वाले उन cultivars को अतिसंवेदनशील माना जाता था। यह पेपर दौड़, रूट-डुबकी, संक्रमित कर्नेल, और संशोधित ट्रे-डुबकी टीकाकरण का पता लगाने के लिए टीकाकरण के तीन अलग-अलग तरीकों का वर्णन करता है, जिनके अनुप्रयोग प्रयोगात्मक डिजाइन के अनुसार भिन्न होते हैं।

Introduction

मृदाजनित कवक जो फुसेरियम ऑक्सीस्पोरम प्रजाति परिसर (एफओएससी) बनाते हैं, वे प्रभावी हेमीबियोट्रोफिक पौधे के रोगजनक हैं जो गंभीर बीमारी का कारण बन सकते हैं और फसलों की एक विविध श्रृंखला में नुकसान उठा सकते^हैं। तरबूज के Fusarium wilt, F. oxysporum f. sp. niveum (Fon) के कारण, पिछले कई दशकों में दुनिया भर में दायरे, घटनाओं और गंभीरता में वृद्धि हो रही है ^2,3. रोपाई में, फुसेरियम विल्ट के लक्षण अक्सर अवमंदन-बंद के समान होते हैं। पुराने पौधों में, पत्ते भूरे, क्लोरोटिक और नेक्रोटिक हो जाते हैं। आखिरकार, पौधों की मुरझाना पूर्ण पौधे के पतन और मृत्यु

Protocol

1. रूट-डुबकी विधि (RDM) द्वारा दौड़ का निर्धारण

1. प्रयोगात्मक वातावरण की तैयारी
   1. क्योंकि लक्षण अभिव्यक्ति पर्यावरणीय स्थितियों पर अत्यधिक निर्भर है, इसलिए एक नियंत्रित क्षेत्र में पौधों को बन?.......

Discussion

रेस टाइपिंग के तीन तरीके प्रस्तुत किए गए हैं। इन विधियों में से प्रत्येक विशेष प्रश्नों और प्रयोगात्मक स्थितियों के लिए सबसे उपयुक्त है। संक्रमित कर्नेल इनोक्यूलेशन विधि (मिट्टी का संक्रमण) शायद सरल.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
100% Fuller’s Earth	Sigma-Aldrich	F200-5KG
1 L glass Erlenmeyer Flask	PYREX	4980-1L
15 mL falcon tubes	Fisher Scientific	14-959-49B
50 mL graduated cylinder	Lab Safety Supply	41121805
50 mL Eppendorf Conical Tubes	Fisher Scientific	05-413-921
Aluminum foil wrap	Reynolds Wrap	720
Bleach	Walmart	587192290
Bunsen burner	Fisher Scientific	03-391-301
CaCO3	sigma-Aldrich	239216
cell spreaders	Fisher Scientific	08-100-11
Cheesecloth	Lions Services, Inc	8305-01-125-0725
Clear plastic dishes	Visions Wave	999RP6CLSS	~15 cm diameter
Clear vinyl tubing for mushroom bag clamps	Shroom Supply		6" for small bag, 8" for medium bag, 10" for large bag
Cotton Balls	Fisherbrand	22-456-885	Sterile
Ethanol	Fisher Chemical	A4094	100%, then combine with water to make 70% for use
Flourescent Tube Lights	MaxLume	Model T5	2800 K Color Temperature, 24'' or 48'' long
granulated agar	VWR International	90000-786
Hand-held Spray Bottle	Ability One	24122002	~0.95 L
hemacytometer	Fisher Scientific	02-671-55A	Two chamber hemacytometer
Lab trays	Fisher Scientific	15-236-2A
Large, sealable plastic bags	Ziploc	430805	38 cm x 38 cm
Mister / watering can	Bar5F	B10H22
Mushroom Bag Clamp	Shroom Supply		6" for small bag, 8" for medium bag, 10" for large bag
Nitrile Gloves	Fisher Scientific	19-130-1597D
Organic Rye Berries	Shroom Supply		0.5 gallon or 25 lb bags
P1000 pipette and tips	Fisher Scientific	14-388-100
Petri dishes	Fisherbrand	FB0875713	Round, 100 mm diameter, 15 mm height
Planting media	Jolly Gardener	Pro-Line C/B
Plastic Pitcher	BrandTech	UX0600850	1 L or larger
Plastic planting pots	Neo/SCI	01-1177	~15 cm diameter and ~10 cm height
Plastic, autoclave-safe bin	Thermo Scientific	UX0601022	3 L
Quarter-strength potato dextrose agar media	Cole-Parmer	UX1420028	Use powder in combination with recipe for QPDA
Scientific Balance Scale, measuring in g	Ohaus	30208458	Any precise scale that can hold and measure 200g will work
Size #4 cork bore	Cole-Parmer	NC9585352
Small Mushroom grow bag	Shroom Supply		0.5 micron filter, also comes in medium and large sizes
Soil trowel	Walmart	563876946
Styrofoam flats (6 x 12 cells)	Speedling	Model TR72A
Styrofoam flats (8 x 16 cells)	Speedling	Model TR128A
Syringe (5 or 10 mL)	fisher Scientific	14-829-19C
Timer	Walmart	TM-01
V8 Original 100% Vegetable Juice	Walmart	564638212
vortex	Fisher Scientific	02-215-418
Watermelon Seed - Black Diamond	Willhite Seed Inc	17
Watermelon Seed - Calhoun Gray	Holmes Seed Company	4440
Watermelon Seed - Charleston Gray	Bonnie Plants	7.15339E+11
Watermelon Seed - PI 296341-FR	Contact authors	Contact authors
Wheat Kernels (Maxie var.) (optional)	Alachua County Feed & Seed