Een robuust ontdekkingsplatform voor de identificatie van nieuwe mediatoren van melanoommetastase

Metastase is een complex proces waarbij cellen barrières moeten overwinnen die slechts onvolledig worden gemodelleerd door in vitro assays. Een systematische workflow werd opgezet met behulp van robuuste, reproduceerbare in vivo modellen en gestandaardiseerde methoden om nieuwe spelers in melanoommetastase te identificeren. Deze benadering maakt het mogelijk om gegevens in specifieke experimentele stadia te laten afleiden om de rol van een gen in metastase nauwkeurig te karakteriseren. Modellen worden vastgesteld door genetisch gemodificeerde melanoomcellen via intracardiale, intradermale of subcutane injecties in muizen te introduceren, gevolgd door monitoring met seriële in vivo beeldvorming. Zodra vooraf vastgestelde eindpunten zijn bereikt, worden primaire tumoren en/of metastasen-dragende organen geoogst en verwerkt voor verschillende analyses. Tumorcellen kunnen worden gesorteerd en onderworpen aan een van de verschillende 'omics'-platforms, waaronder eencellige RNA-sequencing. Organen ondergaan beeldvorming en immunohistopathologische analyses om de totale last van metastasen te kwantificeren en hun specifieke anatomische locatie in kaart te brengen. Deze geoptimaliseerde pijplijn, inclusief gestandaardiseerde protocollen voor engraftment, monitoring, weefseloogst, verwerking en analyse, kan worden gebruikt voor patiënt-afgeleide, kortetermijnculturen en gevestigde menselijke en muizencellijnen van verschillende vaste kankertypen.