产生空突变体以阐明细菌糖基转移酶在细菌运动中的作用

原核生物糖基化的研究是一个快速增长的领域。细菌在其表面上具有不同的糖基化结构，其聚糖构成菌株特异性条形码。与真核生物相比，相关的聚糖在糖组成和结构上表现出更高的多样性，并且在细菌 - 宿主识别过程和与环境的相互作用中很重要。在致病细菌中，糖蛋白已参与感染过程的不同阶段，聚糖修饰会干扰糖蛋白的特定功能。然而，尽管在理解聚糖组成，结构和生物合成途径方面取得了进展，但对糖蛋白在致病性或与环境相互作用中的作用的理解仍然非常有限。此外，在一些细菌中，蛋白质糖基化所需的酶与其他多糖生物合成途径共享，例如脂多糖和胶囊生物合成途径。糖基化的功能重要性已在几种细菌中阐明，通过突变被认为参与糖基化过程的特定基因，并研究其对目标糖蛋白和修饰聚糖表达的影响。嗜温 性气单胞菌 具有单一和 O-糖基化的极性鞭毛。鞭毛聚糖在 气单胞菌 菌株之间显示出碳水化合物成分和链长的多样性。然而，迄今为止分析的所有菌株都显示假氨基酸衍生物作为修饰丝氨酸或苏氨酸残基的连接糖。假鞭毛组装需要假单胞菌酸衍生物，其损失对粘附、生物膜形成和定植有影响。本文中详述的方案描述了如何使用零突变体的构建来了解含有假定糖基转移酶的基因或基因组区域在鞭毛聚糖的生物合成中的参与。这包括了解所涉及的糖基转移酶的功能和聚糖的作用的潜力。这将通过将缺乏聚糖的突变体与野生型菌株进行比较来实现。