मॉडलिंग पैराक्रिन नॉनकैनोनिकल डब्ल्यूएनटी सिग्नलिंग इन विट्रो

नॉनकैनोनिकल डब्ल्यूएनटी सिग्नलिंग इंट्रासेल्युलर एक्टिन फिलामेंट संगठन और भ्रूणजनन के दौरान पूर्वज कोशिकाओं के ध्रुवीकृत प्रवास को नियंत्रित करता है। इस प्रक्रिया में सिग्नल-भेजने और सिग्नल-रिसीविंग कोशिकाओं के बीच जटिल और समन्वित पैराक्रिन इंटरैक्शन की आवश्यकता होती है। यह देखते हुए कि ये इंटरैक्शन विभिन्न वंशों से विभिन्न प्रकार की कोशिकाओं के बीच हो सकते हैं, सेल-विशिष्ट दोषों का विवो मूल्यांकन चुनौतीपूर्ण हो सकता है। वर्तमान अध्ययन इन विट्रो में पैराक्रिन नॉनकैनोनिकल डब्ल्यूएनटी सिग्नलिंग का मूल्यांकन करने के लिए एक अत्यधिक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य विधि का वर्णन करता है। इस प्रोटोकॉल को (1) किसी भी दो सेल प्रकार के हित के बीच नॉनकैनोनिकल डब्ल्यूएनटी सिग्नलिंग के कार्यात्मक और आणविक आकलन करने की क्षमता के साथ डिज़ाइन किया गया था; (2) नॉनकैनोनिकल डब्ल्यूएनटी सिग्नलिंग मार्ग में सिग्नल-भेजने बनाम सिग्नल-प्राप्त अणुओं की भूमिका का विश्लेषण; और (3) मानक आणविक या फार्माकोलॉजिकल दृष्टिकोण के साथ फेनोटाइपिक बचाव प्रयोग करें।

इस प्रोटोकॉल का उपयोग मायोब्लास्ट्स में न्यूरल क्रेस्ट सेल (एनसीसी) -मध्यस्थता नॉनकैनोनिकल डब्ल्यूएनटी सिग्नलिंग का मूल्यांकन करने के लिए किया गया था। एनसीसी की उपस्थिति मायोब्लास्ट्स में फेलोइडिन-पॉजिटिव साइटोप्लाज्मिक फिलोपोडिया और लैमेलिपोडिया की बढ़ती संख्या से जुड़ी हुई है और घाव भरने वाली परख में मायोब्लास्ट माइग्रेशन में सुधार हुआ है। डब्ल्यूएनटी 5 ए-आरओआर 2 अक्ष को एनसीसी और दूसरे हृदय क्षेत्र (एसएचएफ) कार्डियोमायोब्लास्ट पूर्वजों के बीच एक महत्वपूर्ण नॉनकैनोनिकल डब्ल्यूएनटी सिग्नलिंग मार्ग के रूप में पहचाना गया था। अंत में, यह विट्रो में पैराक्रिन नॉनकैनोनिकल डब्ल्यूएनटी सिग्नलिंग तंत्र का अध्ययन करने के लिए एक अत्यधिक ट्रैक्टेबल प्रोटोकॉल है।