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Neuroscience

ग्रेन्युल सेल अग्रदूत में प्राथमिक सिलियम-निर्भर सिग्नलिंग मार्गों का अध्ययन करने के लिए कुशल और लागत प्रभावी इलेक्ट्रोपोरेशन विधि

Published: November 30th, 2021

DOI:

10.3791/63283

1Department of Chemistry, Faculty of Science, Hong Kong Baptist University

Abstract

प्राथमिक सिलियम एक महत्वपूर्ण सिग्नलिंग ऑर्गेनेल है जो लगभग हर सेल पर पाया जाता है जो हेजहोग (एचएच) को सेल की सतह से सिग्नलिंग उत्तेजनाओं को ट्रांसड्यूस करता है। ग्रेन्युल सेल अग्रदूत (जीसीपी) में, प्राथमिक सिलियम एक निर्णायक सिग्नलिंग केंद्र के रूप में कार्य करता है जो एचएच सिग्नलिंग मार्ग को संशोधित करके अग्रदूत सेल प्रसार को ऑर्केस्ट्रेट करता है। प्राथमिक सिलियम-निर्भर एचएच सिग्नलिंग मशीनरी की जांच को प्राथमिक सिलियम में उनके गतिशील स्थानीयकरण की कल्पना करने के लिए मार्ग घटकों के इन विट्रो आनुवंशिक हेरफेर द्वारा सुविधाजनक बनाया जाता है। हालांकि, वर्तमान में ज्ञात इलेक्ट्रोपोरेशन विधियों का उपयोग करके जीसीपी की प्राथमिक संस्कृतियों में ट्रांसजीन का अभिकर्मक आमतौर पर महंगा होता है और अक्सर कम सेल व्यवहार्यता और अवांछनीय अभिकर्मक दक्षता में परिणाम होता है। यह पेपर एक कुशल, लागत प्रभावी और सरल इलेक्ट्रोपोरेशन प्रोटोकॉल का परिचय देता है जो ~ 80-90% और इष्टतम सेल व्यवहार्यता की एक उच्च अभिकर्मक दक्षता को दर्शाता है। यह एक सरल, पुनरुत्पादक और कुशल आनुवंशिक संशोधन विधि है जो प्राथमिक जीसीपी संस्कृतियों में प्राथमिक सिलियम-निर्भर हेजहोग सिग्नलिंग मार्ग के अध्ययन पर लागू होती है।

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