रेस्पिरोमेट्रिक Assays के लिए माउस कंकाल की मांसपेशी से माइटोकॉन्ड्रिया का अलगाव

सेल की अधिकांश ऊर्जा ग्लूकोज, फैटी एसिड और अमीनो एसिड के क्षरण के माध्यम से विभिन्न मार्गों से प्राप्त की जाती है जो माइटोकॉन्ड्रियल ऑक्सीडेटिव फॉस्फोराइलेशन (OXPHOS) प्रणाली पर अभिसरण करते हैं, जो सेलुलर मांगों के जवाब में विनियमित होता है। लिपिड अणु Coenzyme Q (CoQ) निरंतर ऑक्सीकरण / कमी चक्रों के माध्यम से इलेक्ट्रॉन परिवहन श्रृंखला (ETC) में जटिल III में इलेक्ट्रॉनों को स्थानांतरित करके इस प्रक्रिया में आवश्यक है। माइटोकॉन्ड्रिया की स्थिति और, अंततः, सेलुलर स्वास्थ्य का आकलन रेस्पिरोमेट्रिक एसेस का उपयोग करके ईटीसी ऑक्सीजन की खपत को मापकर किया जा सकता है। ये अध्ययन आमतौर पर स्थापित या प्राथमिक सेल लाइनों में किए जाते हैं जिन्हें कई दिनों से सुसंस्कृत किया गया है। दोनों मामलों में, प्राप्त श्वसन पैरामीटर किसी भी दिए गए अंग या ऊतक में सामान्य शारीरिक स्थितियों से विचलित हो सकते हैं।

इसके अतिरिक्त, कंकाल की मांसपेशियों से अलग सुसंस्कृत एकल फाइबर की आंतरिक विशेषताएं इस प्रकार के विश्लेषण को बाधित करती हैं। यह पेपर माउस कंकाल की मांसपेशी से ताजा अलग माइटोकॉन्ड्रिया में श्वसन के विश्लेषण के लिए एक अद्यतन और विस्तृत प्रोटोकॉल प्रस्तुत करता है। हम संभावित समस्याओं के समाधान भी प्रदान करते हैं जो प्रक्रिया के किसी भी चरण में उत्पन्न हो सकते हैं। यहां प्रस्तुत विधि को विविध ट्रांसजेनिक माउस मॉडल में ऑक्सीजन की खपत दरों की तुलना करने और दवा उपचार या उम्र बढ़ने या सेक्स जैसे अन्य कारकों के लिए माइटोकॉन्ड्रियल प्रतिक्रिया का अध्ययन करने के लिए लागू किया जा सकता है। यह माइटोकॉन्ड्रियल बायोएनर्जेटिक्स चयापचय और विनियमन के बारे में महत्वपूर्ण सवालों का जवाब देने के लिए एक व्यवहार्य तरीका है।