Modelo de cirurgia de lesão nervosa poupada modificada de dor neuropática em camundongos

Summary

A cirurgia modificada é um método simplificado para o modelo de lesão nervosa poupada de camundongo ou rato que requer apenas uma ligadura e um corte para lesionar os nervos fibular e sural comuns.

Abstract

A lesão do nervo poupado (SNI) é um modelo animal que imita os sintomas cardinais da lesão do nervo periférico para estudar o mecanismo molecular e celular da dor neuropática em camundongos e ratos. Atualmente, existem dois tipos de modelo de SNI, um para cortar e ligar os nervos fibular comum e tibial com nervo sural intacto, que é definido como SNIs neste estudo, e outro para cortar e ligar os nervos fibular comum e sural com nervo tibial intacto, que é definido como SNIt neste estudo. Como o nervo sural é puramente sensorial, enquanto o nervo tibial contém fibras motoras e sensoriais, o modelo SNIt tem muito menos déficit motor do que o modelo SNIs. No modelo tradicional de camundongo SNIt, os nervos fibular comum e sural são cortados e ligados separadamente. Aqui, um método de cirurgia SNIt modificado é descrito para danificar os nervos fibular e sural comuns com apenas uma ligadura e um corte com um tempo de procedimento mais curto, o que é mais fácil de realizar e reduz o risco potencial de alongamento dos nervos ciático ou tibial, e produz hipersensibilidade mecânica semelhante ao modelo SNIt tradicional.

Introduction

A dor neuropática induzida por lesão nervosa após cirurgia ou trauma tem um ônus econômico significativo que prejudica a qualidade de vida. Uma série de modelos de lesão nervosa, incluindo ligadura do nervo espinhal (SNL)¹, lesão por constrição crônica (CCI)² no nervo ciático, ligadura parcial do nervo ciático (pSNL)³, transação do nervo ciático (SNT)⁴ e lesão do nervo poupado (SNI)5,6,7,8, foram desenvolvidos com sucesso para imitar os sintomas cardinais da lesão do nervo periférico em ratos e camundongos....

Protocol

Os experimentos com animais foram aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da UCSF e foram conduzidos de acordo com o Guia do NIH para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório. Camundongos C57BL/6 adultos pesando 20-30 g foram usados neste estudo. A avaliação de von Frey foi realizada entre 13:00 e 15:00 horas.

1. Anestesia e preparação do camundongo

1. Coloque um camundongo em uma câmara de plástico che.......

Discussion

Comparado ao método tradicional SNIt de camundongo que liga o nervo fibular comum e o nervo sural separadamente 6,7,8,9, o modelo SNIt modificado tem três vantagens: (1) tem menos risco de contrair ou esticar os nervos ciático ou tibial; (2) não há necessidade de remover os cotos do nervo distal após o corte do nervo porque, ligando o nervo fibular comum .......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
6-0 suture	Henry Schein	9007482	Nerve ligation and close the muscular layer
Iris Scissors	Integra Miltex	12460598	Cut muscle and fascia
Mayo dissecting scissors	Fisherbrand	895120	Cut skin incision
Micro forcep	Fisherbrand	16100110	Blunt dissection biceps femoris muscle
Micro Scissors	Excelta	17467496	Cut nerve
Microdissection Forceps	Fisherbrand	16100123	Separate the common peroneal and the sural nerves from the neighboring tissues
Needle Holder	Fisherbrand	8966	Hold 6-0 needle
Prism software	Graph Pad	version 8.0	Statistical analysis software
Wound clips	Roboz Surgical	NC1878744	Close skin incision