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Neuroscience

一种重力喂养的经心灌注方法,用于小鼠中枢神经系统的组织学分析

Published: January 21st, 2022

DOI:

10.3791/63386

1Department of Biochemistry and Molecular Biology, State University of New York Upstate Medical University, 2Department of Neurology, State University of New York Upstate Medical University, 3Department of Neuroscience and Physiology, State University of New York Upstate Medical University

Abstract

从小鼠中分离的脑和脊髓标本的组织学分析是该模型系统中病理学评估的常见做法。为了维持这些脆弱组织的形态,常规通过麻醉动物的心脏插管(输血)给予化学固定剂,如多聚甲醛。传统上,小鼠心脏的经心灌注依赖于使用蠕动泵或气压来提供该过程所需的盐水和固定剂溶液。作为这些方法的易于获得的替代方案,这项工作演示了使用重力进给灌注剂输送方法的使用,该方法使用大多数五金店中可用的材料。

为了验证这种新的灌注方法,这项工作演示了在大脑和脊髓中灵敏检测磷酸化α突触核蛋白所需的所有后续步骤。这些步骤包括解剖固定的脑和脊髓组织,快速冷冻/包埋和冷冻切片以及免疫荧光染色。由于该方法导致固定剂的全身递送,因此它也可用于制备用于组织学分析的其他非神经元组织。

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