マウス中枢神経系の組織学的解析のための重力供給経心筋灌流法

マウスから単離された脳および脊髄標本の組織学的解析は、このモデル系における病理の評価のための一般的な慣行である。これらの繊細な組織の形態を維持するために、麻酔動物における心臓のカニューレ(経心経心灌流)を介してパラホルムアルデヒドなどの化学固定剤を投与することが日常的である。マウス心臓の経心経灌流は、伝統的に、このプロセスに必要な生理食塩水および固定液の両方を提供するために、蠕動ポンプまたは空気圧の使用に依存してきた。これらの方法に代わる容易にアクセスできる代替手段として、この研究は、ほとんどのハードウェア店で入手可能な材料を使用する重力供給式灌流送達方法の使用を実証する。

この新しい灌流法を検証するために、この研究は、脳と脊髄の両方におけるリン酸化α-シヌクレインの高感度検出に必要なすべての後続のステップを実証する。これらのステップには、固定された脳および脊髄組織の解剖、組織の急速凍結/埋め込みおよび凍結切除、および免疫蛍光染色が含まれる。この方法は、固定液の全身送達をもたらすように、組織学的分析のために他の非ニューロン組織を調製するためにも使用され得る。