使用连续截面电子显微镜对肝细胞中组织间接触位点进行三维表征

长期以来，透射电子显微镜一直被认为是细胞超微结构可视化的黄金标准。然而，分析通常局限于二维，妨碍了全面描述细胞器之间三维（3D）超微结构和功能关系的能力。体积电子显微镜（vEM）描述了一系列技术，这些技术能够以中尺度，微尺度和纳米级分辨率在3D中询问细胞超微结构。

该协议提供了一种可访问且可靠的方法，可以使用串行截面传输EM（TEM）采集vEM数据，并在单个简单的工作流程中涵盖样品处理到数字3D重建的技术方面。为了证明该技术的有用性，提出了内质网和线粒体及其在肝细胞中的接触位点之间的3D超微结构关系。组织间接触在细胞器之间的离子、脂质、营养物质和其他小分子的转移中起着至关重要的作用。然而，尽管它们在肝细胞中最初被发现，但关于它们的物理特征，动力学和功能仍然有很多需要了解的地方。

舌间接触可以显示一系列形态，在两个细胞器彼此之间的接近程度（通常约为10-30nm）和接触部位的范围（从点状接触到较大的3D蓄水池样接触）方面有所不同。密切接触者的检查需要高分辨率成像，连续切片TEM非常适合可视化肝细胞分化过程中组织间接触的3D超微结构，以及与代谢疾病相关的肝细胞结构的改变。