אפיון תלת מימדי של אתרי מגע בין-אורגניים בהפטוציטים באמצעות מיקרוסקופיית אלקטרונים חתך טורי

מיקרוסקופיית אלקטרונים של תמסורת נחשבת זה מכבר לתקן הזהב להדמיה של מבנה-על תאי. עם זאת, האנליזה מוגבלת לעתים קרובות לשני ממדים, מה שמקשה על היכולת לתאר באופן מלא את המבנה התלת-ממדי (התלת-ממדי) ואת הקשר התפקודי בין האברונים. מיקרוסקופיית אלקטרונים בנפח (vEM) מתארת אוסף של טכניקות המאפשרות חקירה של מבנה-על תאי בתלת-ממד ברזולוציות מזוקליות, מיקרו-קנה מידה וננומטריות.

פרוטוקול זה מספק שיטה נגישה וחזקה להשגת נתוני vEM באמצעות EM (TEM) של העברת מקטעים טוריים ומכסה את ההיבטים הטכניים של עיבוד דגימות עד לשחזור תלת-ממדי דיגיטלי בתהליך עבודה יחיד ופשוט. כדי להדגים את התועלת של טכניקה זו, מוצג הקשר האולטרה-סטרוקטורלי התלת-ממדי בין הרשתית האנדופלסמית והמיטוכונדריה לבין אתרי המגע שלהם בהפטוציטים בכבד. מגעים בין-אורגניים ממלאים תפקידים חיוניים בהעברת יונים, שומנים, חומרים מזינים ומולקולות קטנות אחרות בין אברונים. עם זאת, למרות הגילוי הראשוני שלהם בהפטוציטים, עדיין יש הרבה מה ללמוד על התכונות הפיזיות שלהם, הדינמיקה והתפקודים שלהם.

אנשי קשר בין-אורגניים יכולים להציג מגוון של מורפולוגיות, המשתנות בסמיכות של שני האברונים זה לזה (בדרך כלל ~ 10-30 ננומטר) ובהיקף אתר המגע (החל מאנשי קשר נוקבים וכלה באנשי קשר תלת-ממדיים גדולים יותר דמויי ציסטרנל). בדיקת מגעים קרובים דורשת הדמיה ברזולוציה גבוהה, ו- TEM מקטע סדרתי מתאים היטב כדי לדמיין את האולטרה-סטרוקטורל התלת-ממדי של מגעים בין-אורגניים במהלך התמיינות הפטוציטים, כמו גם שינויים בארכיטקטורת הפטוציטים הקשורים למחלות מטבוליות.