解剖、固定和可视化 果蝇 蛹

果蝇黑腹蛹在过程中几天不动，在此期间它们发展出具有薄透明成虫外皮的新身体。它们的不动性和透明度使其成为体内实时成像实验的理想选择。许多研究都集中在蛹的背上皮单层上，因为它的可接近性和相对较大的尺寸。除了研究上皮力学和发育外，骨骼一直是研究伤口愈合的理想组织。受伤后，整个上皮修复过程可以通过6-12小时的实时成像来捕获。尽管notum在实时成像中很受欢迎，但很少有已发表的研究使用固定的notum样本。固定和染色是几乎所有其他果蝇组织的常用方法，利用了简单细胞染色和抗体的大量库。然而，蛹是脆弱的，从体内取出后容易卷曲和变形，因此很难补充现场成像。该协议为固定和染色蛹提供了一种简单的方法，无论是完整的还是在激光损伤后。使用这种技术，将蛹的腹侧粘在盖玻片上以固定蛹，并且仔细地去除，固定和染色公瘤。上皮套安装在载玻片上或两个盖玻片之间，以方便从组织的背侧或腹侧进行成像。