Abstract
Neuroscience
Les organoïdes cérébraux sont des modèles tridimensionnels du cerveau humain en développement et fournissent une plate-forme convaincante et de pointe pour la modélisation des maladies et le dépistage génomique et médicamenteux à grande échelle. En raison de la nature auto-organisée des cellules dans les organoïdes cérébraux et de la gamme croissante de protocoles disponibles pour leur génération, des problèmes d’hétérogénéité et de variabilité entre les organoïdes ont été identifiés. Dans cet article de protocole, nous décrivons un protocole robuste et reproductible qui surmonte en grande partie ces problèmes et génère des organoïdes corticaux à partir de progéniteurs neuroectodermiques en 1 mois, et qui peut être maintenu pendant plus de 1 an. Ce protocole hautement reproductible peut être facilement réalisé dans une salle de culture tissulaire standard et donne des organoïdes avec une riche diversité de types de cellules que l’on trouve généralement dans le cortex humain en développement. Malgré leur composition développementale précoce, les neurones et autres types de cellules cérébrales humaines commenceront à présenter les signes typiques de sénescence dans les cellules neuronales après une culture in vitro prolongée, ce qui en fait une plate-forme précieuse et utile pour l’étude des processus neuronaux liés au vieillissement. Ce protocole décrit également une méthode pour détecter de telles cellules sénescentes dans les organoïdes cérébraux corticaux en utilisant la coloration à la bêta-galactosidase associée à la sénescence.
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