इन विट्रो में मस्तिष्क न्यूरोनल सेनेसेंस मॉडलिंग के लिए कॉर्टिकल ब्रेन ऑर्गेनोइड की मजबूत और अत्यधिक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य पीढ़ी

मस्तिष्क ऑर्गेनोइड विकासशील मानव मस्तिष्क के त्रि-आयामी मॉडल हैं और रोग मॉडलिंग और बड़े पैमाने पर जीनोमिक और ड्रग स्क्रीनिंग के लिए एक सम्मोहक, अत्याधुनिक मंच प्रदान करते हैं। मस्तिष्क ऑर्गेनोइड में कोशिकाओं की आत्म-संगठित प्रकृति और उनकी पीढ़ी के लिए उपलब्ध प्रोटोकॉल की बढ़ती सीमा के कारण, ऑर्गेनोइड के बीच विषमता और परिवर्तनशीलता के मुद्दों की पहचान की गई है। इस प्रोटोकॉल पेपर में, हम एक मजबूत और प्रतिकृति प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं जो काफी हद तक इन मुद्दों पर काबू पाता है और 1 महीने के भीतर न्यूरोएक्टोडर्मल पूर्वजों से कॉर्टिकल ऑर्गेनोइड उत्पन्न करता है, और जिसे 1 वर्ष से अधिक समय तक बनाए रखा जा सकता है। यह अत्यधिक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य प्रोटोकॉल आसानी से एक मानक ऊतक संस्कृति कमरे में किया जा सकता है और आमतौर पर विकासशील मानव प्रांतस्था में पाए जाने वाले सेल प्रकारों की एक समृद्ध विविधता के साथ ऑर्गेनोइड में परिणाम होता है। उनके शुरुआती विकासात्मक मेकअप के बावजूद, न्यूरॉन्स और अन्य मानव मस्तिष्क कोशिका प्रकार इन विट्रो संस्कृति में लंबे समय तक रहने के बाद न्यूरोनल कोशिकाओं में वृद्धावस्था के विशिष्ट संकेतों को प्रदर्शित करना शुरू कर देंगे, जिससे उन्हें उम्र बढ़ने से संबंधित न्यूरोनल प्रक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए एक मूल्यवान और उपयोगी मंच मिल जाएगा। यह प्रोटोकॉल सेनेसेंस से जुड़े बीटा-गैलेक्टोसिडेस धुंधला का उपयोग करके कॉर्टिकल मस्तिष्क ऑर्गेनोइड में ऐसी सेनेसेंट कोशिकाओं का पता लगाने के लिए एक विधि की रूपरेखा भी तैयार करता है।