インビトロでの脳ニューロン老化のモデリングのための皮質脳オルガノイドの堅牢で再現性の高い生成

脳オルガノイドは、発達中のヒト脳の3次元モデルであり、疾患モデリング、大規模なゲノムおよび薬物スクリーニングのための説得力のある最先端のプラットフォームを提供します。脳オルガノイド中の細胞の自己組織化の性質と、それらの生成に利用可能なプロトコルの範囲が拡大しているため、オルガノイド間の不均一性および変動性の問題が同定されている。このプロトコルペーパーでは、これらの問題を大部分克服し、1ヶ月以内に神経外胚葉前駆細胞から皮質オルガノイドを生成し、1年以上維持することができる堅牢で複製可能なプロトコルについて説明します。この再現性の高いプロトコールは、標準的な組織培養室で容易に実施することができ、その結果、発達中のヒト皮質に典型的に見られる豊富な多様性を有するオルガノイドが得られる。初期の発達構成にもかかわらず、ニューロンおよび他のヒト脳細胞型は、長期間のイン ビトロ 培養後にニューロン細胞において老化の典型的な徴候を示し始め、老化関連ニューロンプロセスを研究するための貴重で有用なプラットフォームとなる。このプロトコルはまた、老化関連β−ガラクトシダーゼ染色を用いて皮質脳オルガノイド中のこのような老化細胞を検出するための方法を概説する。