Abstract
Neuroscience
Hjerneorganoider er tredimensjonale modeller av den utviklende menneskelige hjerne og gir en overbevisende, banebrytende plattform for sykdomsmodellering og storskala genomisk og narkotika screening. På grunn av den selvorganiserende naturen til celler i hjerneorganoider og det voksende spekteret av tilgjengelige protokoller for deres generasjon, har problemer med heterogenitet og variabilitet mellom organoider blitt identifisert. I dette protokollpapiret beskriver vi en robust og replikerbar protokoll som i stor grad overvinner disse problemene og genererer kortikale organoider fra nevroektodermale forfedre innen 1 måned, og som kan opprettholdes i mer enn 1 år. Denne svært reproduserbare protokollen kan enkelt utføres i et standard vevskulturrom og resulterer i organoider med et rikt mangfold av celletyper som vanligvis finnes i den utviklende menneskelige cortex. Til tross for deres tidlige utviklingssammensetning, vil nevroner og andre menneskelige hjernecelletyper begynne å vise de typiske tegnene på senescens i nevronceller etter langvarig in vitro-kultur , noe som gjør dem til en verdifull og nyttig plattform for å studere aldringsrelaterte nevronprosesser. Denne protokollen skisserer også en metode for å oppdage slike senescentceller i kortikale hjerneorganoider ved bruk av senescensassosiert beta-galaktosidasefarging.
Explore More Videos
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved