Beyin Nöronal Yaşlanmasını Modellemek için Kortikal Beyin Organoidlerinin Sağlam ve Yüksek Oranda Yeniden Üretilebilir Üretimi In Vitro

Beyin organoidleri, gelişmekte olan insan beyninin üç boyutlu modelleridir ve hastalık modellemesi ve büyük ölçekli genomik ve ilaç taraması için zorlayıcı, son teknoloji bir platform sağlar. Beyin organoidlerindeki hücrelerin kendi kendini organize eden doğası ve nesilleri için mevcut protokollerin artan yelpazesi nedeniyle, organoidler arasındaki heterojenlik ve değişkenlik ile ilgili sorunlar tespit edilmiştir. Bu protokol makalesinde, bu sorunların büyük ölçüde üstesinden gelen ve 1 ay içinde nöroektodermal progenitörlerden kortikal organoidler üreten ve 1 yıldan fazla bir süre boyunca korunabilen sağlam ve tekrarlanabilir bir protokolü tanımlamaktayız. Bu yüksek oranda tekrarlanabilir protokol, standart bir doku kültürü odasında kolayca gerçekleştirilebilir ve tipik olarak gelişmekte olan insan korteksinde bulunan zengin bir hücre tipi çeşitliliğine sahip organoidlerle sonuçlanır. Erken gelişimsel yapılarına rağmen, nöronlar ve diğer insan beyin hücresi tipleri, uzun süreli in vitro kültürden sonra nöronal hücrelerde tipik yaşlanma belirtileri göstermeye başlayacak ve bu da onları yaşlanma ile ilgili nöronal süreçleri incelemek için değerli ve yararlı bir platform haline getirecektir. Bu protokol ayrıca, yaşlanma ile ilişkili beta-galaktosidaz boyamasını kullanarak kortikal beyin organoidlerinde bu tür yaşlanan hücreleri tespit etmek için bir yöntem özetlemektedir.