אלקטרופורציה של דנ"א פלסמיד לשריר השלד של העכבר

אפנון ביטוי גנים חולף בשריר השלד של מורין על ידי אלקטרופורציה של פלסמיד הוא כלי שימושי להערכת פיזיולוגיה נורמלית ופתולוגית. ביטוי יתר או הפלה של גני מטרה מאפשר לחוקרים לתמרן אירועים מולקולריים בודדים, ובכך להבין טוב יותר את המנגנונים המשפיעים על מסת השריר, על חילוף החומרים של השריר ועל התכווצותו. בנוסף, אלקטרופורציה של פלסמידי דנ"א המקודדים תגים פלואורסצנטיים מאפשרת לחוקרים למדוד שינויים בלוקליזציה תת-תאית של חלבונים בשרירי השלד in vivo. הערכה תפקודית מרכזית של שרירי השלד כוללת מדידה של התכווצות השרירים. בפרוטוקול זה אנו מראים כי מחקרי התכווצות שרירים שלמים עדיין אפשריים לאחר הזרקת דנ"א פלסמידית, אלקטרופורציה ומודולציה של ביטוי גנים. מטרתו של הליך הדרכה זה היא להדגים את השיטה שלב אחר שלב של אלקטרופורציה של פלסמיד דנ"א לתוך שרירי השלד של העכבר כדי להקל על קליטה וביטוי במיופיבר של שרירי הטיביאליס הקדמיים והיציבים של שרירי ה- ditensor digitorum longus, כמו גם כדי להראות כי התכווצות שרירי השלד אינה נפגעת על ידי הזרקה ואלקטרופורציה.