Fremstilling og anvendelse af tørre makroporøse alginatstilladser til viral transduktion af T-celler

Genteknologi af T-celler til CAR-T-celleterapi er kommet i spidsen for kræftbehandling i løbet af de sidste par år. CAR-T-celler produceres ved viral genoverførsel til T-celler. Den nuværende guldstandard for viral genoverførsel involverer spinokulation af retronectinbelagte plader, hvilket er dyrt og tidskrævende. Der er et betydeligt behov for effektive og omkostningseffektive metoder til at generere CAR-T-celler. Beskrevet her er en metode til fremstilling af billige, tørre makroporøse alginatstilladser, kendt som Drydux-stilladser, der effektivt fremmer viral transduktion af aktiverede T-celler. Stilladserne er designet til at blive brugt i stedet for guldstandard spinokulation af retronectinbelagte plader podet med virus og forenkle processen til transducering af celler. Alginat er tværbundet med calcium-D-gluconat og frosset natten over for at skabe stilladserne. De frosne stilladser frysetørres i en frysetørrer i 72 timer for at fuldføre dannelsen af de tørre makroporøse stilladser. Stilladserne formidler viral genoverførsel, når virus og aktiverede T-celler podes sammen oven på stilladset for at producere genetisk modificerede celler. Stilladserne producerer >85% primær T-celletransduktion, hvilket kan sammenlignes med transduktionseffektiviteten af spinokulation på retronectinbelagte plader. Disse resultater viser, at tørre makroporøse alginatstilladser tjener som et billigere og mere bekvemt alternativ til den konventionelle transduktionsmetode.