通过全内反射荧光（TIRF）显微镜 在体外 可视化肌动蛋白和微管耦合动力学

传统上，肌动蛋白和微管细胞骨架已被研究为独立的实体，仅限于特定的细胞区域或过程，并由每种聚合物独特的不同结合蛋白套件调节。现在许多研究表明，两种细胞骨架聚合物的动力学是相互交织在一起的，并且这种串扰是大多数细胞行为所必需的。已经鉴定出许多参与肌动蛋白 - 微管相互作用的蛋白质（即Tau，MACF，GAS，formins等），并且仅就肌动蛋白或微管具有良好的表征。然而，相对较少的研究表明，肌动蛋白- 微管与两种聚合物的动态版本的配位测定。这可能会阻塞肌动蛋白和微管之间的紧急连接机制。在这里，基于全内反射荧光（TIRF）显微镜 的体外 重构技术允许从一种生化反应中可视化肌动蛋白和微管动力学。该技术单独或在另一种聚合物存在下保留了肌动蛋白丝或微管的聚合动力学。市售的Tau蛋白用于证明在经典细胞骨架交联蛋白存在下肌动蛋白 - 微管行为如何变化。这种方法可以为单个调节蛋白如何在单丝或高阶复合物的分辨率下协调肌动蛋白 - 微管动力学提供可靠的功能和机制见解。