कुल आंतरिक प्रतिबिंब प्रतिदीप्ति (टीआईआरएफ) माइक्रोस्कोपी द्वारा इन विट्रो में एक्टिन और सूक्ष्मनलिका युग्मन गतिशीलता की कल्पना करना

परंपरागत रूप से, एक्टिन और सूक्ष्मनलिका साइटोस्केलेटन का अध्ययन अलग-अलग संस्थाओं के रूप में किया गया है, जो विशिष्ट सेलुलर क्षेत्रों या प्रक्रियाओं तक सीमित है, और प्रत्येक बहुलक के लिए अद्वितीय बाध्यकारी प्रोटीन के विभिन्न सूट द्वारा विनियमित किया गया है। कई अध्ययनों से अब पता चलता है कि दोनों साइटोस्केलेटल पॉलिमर की गतिशीलता आपस में जुड़ी हुई है और अधिकांश सेलुलर व्यवहारों के लिए इस क्रॉसस्टॉक की आवश्यकता होती है। एक्टिन-सूक्ष्मनलिकाएं इंटरैक्शन में शामिल कई प्रोटीन पहले से ही पहचाने जा चुके हैं (यानी, ताऊ, एमएसीएफ, जीएएस, फॉर्मिन, और अधिक) और अकेले एक्टिन या सूक्ष्मनलिकाएं के संबंध में अच्छी तरह से विशेषता है। हालांकि, अपेक्षाकृत कम अध्ययनों ने दोनों पॉलिमर के गतिशील संस्करणों के साथ एक्टिन-सूक्ष्मनलिका समन्वय के परख दिखाए। यह एक्टिन और सूक्ष्मनलिकाएं के बीच आकस्मिक लिंकिंग तंत्र को रोक सकता है। यहां, कुल आंतरिक प्रतिबिंब प्रतिदीप्ति (टीआईआरएफ) माइक्रोस्कोपी-आधारित इन विट्रो पुनर्गठन तकनीक एक जैव रासायनिक प्रतिक्रिया से एक्टिन और सूक्ष्मनलिका गतिशीलता दोनों के दृश्य की अनुमति देती है। यह तकनीक व्यक्तिगत रूप से या अन्य बहुलक की उपस्थिति में एक्टिन फिलामेंट या सूक्ष्मनलिकाएं की पोलीमराइजेशन गतिशीलता को संरक्षित करती है। व्यावसायिक रूप से उपलब्ध ताऊ प्रोटीन का उपयोग यह प्रदर्शित करने के लिए किया जाता है कि क्लासिक साइटोस्केलेटल क्रॉसलिंकिंग प्रोटीन की उपस्थिति में एक्टिन-सूक्ष्मनलिका व्यवहार कैसे बदलते हैं। यह विधि विश्वसनीय कार्यात्मक और यंत्रवत अंतर्दृष्टि प्रदान कर सकती है कि व्यक्तिगत नियामक प्रोटीन एकल फिलामेंट्स या उच्च-क्रम परिसरों के संकल्प पर एक्टिन-सूक्ष्मनलिका गतिशीलता का समन्वय कैसे करते हैं।