מודל עכבר של פיברוזיס ריאתי המושרה על ידי נבוליזציה של בלומיצין באף

Summary

מודלים שונים של בעלי חיים של פיברוזיס ריאתי הוקמו באמצעות בלומיצין כדי להבהיר את הפתוגנזה של פיברוזיס ריאתי ולמצוא מטרות תרופות חדשות. עם זאת, רוב המודלים פיברוזיס ריאתי המכוונים לרקמת הריאה יש מתן תרופות לא אחיד. כאן, אנו מציעים מודל של פיברוזיס ריאתי אחיד המושרה על ידי nebulization בלומיצין האף.

Abstract

פיברוזיס ריאתי אופייני למספר מחלות ריאה אנושיות הנובעות מסיבות שונות. בהתחשב בכך שאפשרויות הטיפול מוגבלות למדי, מודלים של עכברים ממשיכים להיות כלי חשוב לפיתוח אסטרטגיות אנטי-פיברוטיות חדשות. במחקר זה, מתן תוך ריאתי של בלומיצין (BLM) מתבצע על ידי ערפיליזציה של האף כדי ליצור מודל עכברי של פיברוזיס ריאתי המחקה באופן הדוק מאפייני מחלה קליניים. עכברי C57BL/6 קיבלו BLM (7 U/mL, 30 דקות ליום) על ידי ערפיליזציה באף במשך 3 ימים רצופים והוקרבו ביום 9, 16 או 23 כדי לצפות בשינויים דלקתיים ופיברוטיים ברקמת הריאה. BLM אירוסולי באף התמקד ישירות בריאות, וכתוצאה מכך דלקת ריאות נרחבת ואחידה ופיברוזיס. לפיכך, יצרנו בהצלחה מודל עכברי ניסיוני של פיברוזיס ריאתי אנושי טיפוסי. שיטה זו יכולה לשמש בקלות כדי ללמוד את ההשפעות של מתן אירוסולים שונים באף על פתופיזיולוגיה של הריאות ולאמת טיפולים אנטי דלקתיים ואנטי פיברוטיים חדשים.

Introduction

פיברוזיס ריאתי הוא תהליך מחלה פרוגרסיבי שבו שקיעת יתר של רכיבי מטריצה חוץ-תאיים, בעיקר קולגן מסוג I, באינטרסטיציום של הריאות מובילה לתפקוד ריאות לקוי¹. הפתופיזיולוגיה של פיברוזיס ריאתי מורכבת, ואפשרויות הטיפול כיום מוגבלות למדי. מודלים עכבריים נותרו כלי חשוב לחקר המנגנונים הפתוגניים התורמים להופעתה והתקדמותה של המחלה, כמו גם אסטרטגיות חדשות לפיתוח תרופות.

מגוון מודלים של פיברוזיס ריאתי בבעלי חיים מסתמכים על החדרה תוך-טרכאלית של BLM 2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12.

Protocol

הוועדה ללימודי בעלי חיים של בית החולים לידידות סין-יפן (בייג'ינג, סין) אישרה את כל ההליכים המערבים עכברים שבוצעו במסגרת מחקר זה (NO.190108). עכברים הוחזקו בחדר החיות הסטרילי של מכון המחקר הרפואי הקליני ידידות סין-יפן, עם טמפרטורת חדר של 20-25 מעלות צלזיוס, לחות יחסית של 40%-70%, עוצמת.......

Discussion

הזרקה תוך טרכאלית של בלומיצין גורמת לתגובה דלקתית ופיברוטית חריפה בשתי הריאות ויכולה להיחשב כגישה יעילה לביסוס מודל עכברי ניסיוני של מחלת ריאות אינטרסטיציאלית אנושית. מתן תוך קנה הנשימה הוא המסלול הנפוץ ביותר של מתן 2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12.<.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
bleomycin	Bioway/Nippon Kayaku Co Ltd	DP721	Fibrosis model drugs
0.9% saline for injection	Baxter Healthcare(Tianjin)Co.,Ltd.		Bleomycin preparation
1 mL syringe	BD	300481	Anesthetize animals
10% neutral formalin buffer	TechaLab Biotech Company		Fix lung tissue
15 mL centrifuge tube	corning	430790	Prepare for anesthesia
20 °C refrigerator	New-fly group	BCD-213K	Store drugs
4 °C refrigerator	New-fly group	BCD-213K	Store drugs
Adobe illustrator cc2020	Adobe		Process images
blue back liquid	Beijing Chemical Works		tissue staining
clean bench	Suzhou Sujie Purifying Equipment Co.,Ltd.		Bleomycin preparation
differentiation fluid	Beijing Chemical Works		tissue staining
Electronic balance	METTLER TOLEDO	AA-160	Prepare for anesthesia
eosin stain	Beijing Yili Fine Chemicals Co,Ltd.		tissue staining
Heating pad	HIDOM		Mice incubation
hematoxylin stain	Beijing Yili Fine Chemicals Co,Ltd.		tissue staining
phosphate buffered saline (PBS) buffer	Hyclone	SH30256.01	Clean lung tissue
Photoshop drawing software	Adobe		Process images
SCIREQ INEXPOSE	EMKA Biotech Beijing Co.,Ltd.		Atomizing device
Upright fluorescence microscope	Olympus	BX53	Observe the slice