Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • Representative Results
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

מודלים שונים של בעלי חיים של פיברוזיס ריאתי הוקמו באמצעות בלומיצין כדי להבהיר את הפתוגנזה של פיברוזיס ריאתי ולמצוא מטרות תרופות חדשות. עם זאת, רוב המודלים פיברוזיס ריאתי המכוונים לרקמת הריאה יש מתן תרופות לא אחיד. כאן, אנו מציעים מודל של פיברוזיס ריאתי אחיד המושרה על ידי nebulization בלומיצין האף.

Abstract

פיברוזיס ריאתי אופייני למספר מחלות ריאה אנושיות הנובעות מסיבות שונות. בהתחשב בכך שאפשרויות הטיפול מוגבלות למדי, מודלים של עכברים ממשיכים להיות כלי חשוב לפיתוח אסטרטגיות אנטי-פיברוטיות חדשות. במחקר זה, מתן תוך ריאתי של בלומיצין (BLM) מתבצע על ידי ערפיליזציה של האף כדי ליצור מודל עכברי של פיברוזיס ריאתי המחקה באופן הדוק מאפייני מחלה קליניים. עכברי C57BL/6 קיבלו BLM (7 U/mL, 30 דקות ליום) על ידי ערפיליזציה באף במשך 3 ימים רצופים והוקרבו ביום 9, 16 או 23 כדי לצפות בשינויים דלקתיים ופיברוטיים ברקמת הריאה. BLM אירוסולי באף התמקד ישירות בריאות, וכתוצאה מכך דלקת ריאות נרחבת ואחידה ופיברוזיס. לפיכך, יצרנו בהצלחה מודל עכברי ניסיוני של פיברוזיס ריאתי אנושי טיפוסי. שיטה זו יכולה לשמש בקלות כדי ללמוד את ההשפעות של מתן אירוסולים שונים באף על פתופיזיולוגיה של הריאות ולאמת טיפולים אנטי דלקתיים ואנטי פיברוטיים חדשים.

Introduction

פיברוזיס ריאתי הוא תהליך מחלה פרוגרסיבי שבו שקיעת יתר של רכיבי מטריצה חוץ-תאיים, בעיקר קולגן מסוג I, באינטרסטיציום של הריאות מובילה לתפקוד ריאות לקוי1. הפתופיזיולוגיה של פיברוזיס ריאתי מורכבת, ואפשרויות הטיפול כיום מוגבלות למדי. מודלים עכבריים נותרו כלי חשוב לחקר המנגנונים הפתוגניים התורמים להופעתה והתקדמותה של המחלה, כמו גם אסטרטגיות חדשות לפיתוח תרופות.

מגוון מודלים של פיברוזיס ריאתי בבעלי חיים מסתמכים על החדרה תוך-טרכאלית של BLM 2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12.

Protocol

הוועדה ללימודי בעלי חיים של בית החולים לידידות סין-יפן (בייג'ינג, סין) אישרה את כל ההליכים המערבים עכברים שבוצעו במסגרת מחקר זה (NO.190108). עכברים הוחזקו בחדר החיות הסטרילי של מכון המחקר הרפואי הקליני ידידות סין-יפן, עם טמפרטורת חדר של 20-25 מעלות צלזיוס, לחות יחסית של 40%-70%, עוצמת.......

Representative Results

פגיעה ריאתית נגרמה על ידי BLM ערפילי, וחיות הביקורת עברו ערפיליזציה עם אותו נפח של מי מלח רגילים. העכברים עברו ערפיליזציה פעם ביום במשך 3 ימים, 30 דקות ביום, תוך שימוש בריכוז BLM של 7 U/mL. עכברים הוקרבו בימים 9, 16 ו-23 לאחר מתן BLM עבור צביעת H&E (איור 2B). נגעים פנאומוניים מפוזר.......

Discussion

הזרקה תוך טרכאלית של בלומיצין גורמת לתגובה דלקתית ופיברוטית חריפה בשתי הריאות ויכולה להיחשב כגישה יעילה לביסוס מודל עכברי ניסיוני של מחלת ריאות אינטרסטיציאלית אנושית. מתן תוך קנה הנשימה הוא המסלול הנפוץ ביותר של מתן 2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12.<.......

Disclosures

למחברים אין ניגודי עניינים לחשוף.

Acknowledgements

עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מס '92068108).

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
 bleomycinBioway/Nippon Kayaku Co Ltd DP721Fibrosis model drugs
0.9% saline for injectionBaxter Healthcare(Tianjin)Co.,Ltd.Bleomycin preparation
1 mL syringeBD300481Anesthetize animals
10% neutral formalin bufferTechaLab Biotech CompanyFix lung tissue
15 mL centrifuge tubecorning430790Prepare for anesthesia
20 °C refrigeratorNew-fly groupBCD-213KStore drugs
4 °C refrigeratorNew-fly groupBCD-213KStore drugs
Adobe illustrator cc2020AdobeProcess images
blue back liquidBeijing Chemical Workstissue staining
clean benchSuzhou Sujie Purifying Equipment Co.,Ltd.Bleomycin preparation
differentiation fluidBeijing Chemical Workstissue staining
Electronic balanceMETTLER TOLEDOAA-160Prepare for anesthesia
eosin stainBeijing Yili Fine Chemicals Co,Ltd.tissue staining
Heating padHIDOMMice incubation
hematoxylin stainBeijing Yili Fine Chemicals Co,Ltd.tissue staining
phosphate buffered saline (PBS) bufferHycloneSH30256.01Clean lung tissue
Photoshop drawing softwareAdobeProcess images
SCIREQ INEXPOSEEMKA Biotech Beijing Co.,Ltd.Atomizing device
Upright fluorescence microscopeOlympusBX53Observe the slice

References

  1. Raghu, G., et al. Diagnosis of idiopathic pulmonary fibrosis. An official ATS/ERS/JRS/ALAT clinical practice guideline. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 198 (5), e44-e68 (2018).
  2. Moore, B. B., Hogaboam, C. M.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved