A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
מודלים שונים של בעלי חיים של פיברוזיס ריאתי הוקמו באמצעות בלומיצין כדי להבהיר את הפתוגנזה של פיברוזיס ריאתי ולמצוא מטרות תרופות חדשות. עם זאת, רוב המודלים פיברוזיס ריאתי המכוונים לרקמת הריאה יש מתן תרופות לא אחיד. כאן, אנו מציעים מודל של פיברוזיס ריאתי אחיד המושרה על ידי nebulization בלומיצין האף.
פיברוזיס ריאתי אופייני למספר מחלות ריאה אנושיות הנובעות מסיבות שונות. בהתחשב בכך שאפשרויות הטיפול מוגבלות למדי, מודלים של עכברים ממשיכים להיות כלי חשוב לפיתוח אסטרטגיות אנטי-פיברוטיות חדשות. במחקר זה, מתן תוך ריאתי של בלומיצין (BLM) מתבצע על ידי ערפיליזציה של האף כדי ליצור מודל עכברי של פיברוזיס ריאתי המחקה באופן הדוק מאפייני מחלה קליניים. עכברי C57BL/6 קיבלו BLM (7 U/mL, 30 דקות ליום) על ידי ערפיליזציה באף במשך 3 ימים רצופים והוקרבו ביום 9, 16 או 23 כדי לצפות בשינויים דלקתיים ופיברוטיים ברקמת הריאה. BLM אירוסולי באף התמקד ישירות בריאות, וכתוצאה מכך דלקת ריאות נרחבת ואחידה ופיברוזיס. לפיכך, יצרנו בהצלחה מודל עכברי ניסיוני של פיברוזיס ריאתי אנושי טיפוסי. שיטה זו יכולה לשמש בקלות כדי ללמוד את ההשפעות של מתן אירוסולים שונים באף על פתופיזיולוגיה של הריאות ולאמת טיפולים אנטי דלקתיים ואנטי פיברוטיים חדשים.
פיברוזיס ריאתי הוא תהליך מחלה פרוגרסיבי שבו שקיעת יתר של רכיבי מטריצה חוץ-תאיים, בעיקר קולגן מסוג I, באינטרסטיציום של הריאות מובילה לתפקוד ריאות לקוי1. הפתופיזיולוגיה של פיברוזיס ריאתי מורכבת, ואפשרויות הטיפול כיום מוגבלות למדי. מודלים עכבריים נותרו כלי חשוב לחקר המנגנונים הפתוגניים התורמים להופעתה והתקדמותה של המחלה, כמו גם אסטרטגיות חדשות לפיתוח תרופות.
מגוון מודלים של פיברוזיס ריאתי בבעלי חיים מסתמכים על החדרה תוך-טרכאלית של BLM 2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12.
הוועדה ללימודי בעלי חיים של בית החולים לידידות סין-יפן (בייג'ינג, סין) אישרה את כל ההליכים המערבים עכברים שבוצעו במסגרת מחקר זה (NO.190108). עכברים הוחזקו בחדר החיות הסטרילי של מכון המחקר הרפואי הקליני ידידות סין-יפן, עם טמפרטורת חדר של 20-25 מעלות צלזיוס, לחות יחסית של 40%-70%, עוצמת.......
פגיעה ריאתית נגרמה על ידי BLM ערפילי, וחיות הביקורת עברו ערפיליזציה עם אותו נפח של מי מלח רגילים. העכברים עברו ערפיליזציה פעם ביום במשך 3 ימים, 30 דקות ביום, תוך שימוש בריכוז BLM של 7 U/mL. עכברים הוקרבו בימים 9, 16 ו-23 לאחר מתן BLM עבור צביעת H&E (איור 2B). נגעים פנאומוניים מפוזר.......
הזרקה תוך טרכאלית של בלומיצין גורמת לתגובה דלקתית ופיברוטית חריפה בשתי הריאות ויכולה להיחשב כגישה יעילה לביסוס מודל עכברי ניסיוני של מחלת ריאות אינטרסטיציאלית אנושית. מתן תוך קנה הנשימה הוא המסלול הנפוץ ביותר של מתן 2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12.<.......
עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מס '92068108).
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
bleomycin | Bioway/Nippon Kayaku Co Ltd | DP721 | Fibrosis model drugs |
0.9% saline for injection | Baxter Healthcare(Tianjin)Co.,Ltd. | Bleomycin preparation | |
1 mL syringe | BD | 300481 | Anesthetize animals |
10% neutral formalin buffer | TechaLab Biotech Company | Fix lung tissue | |
15 mL centrifuge tube | corning | 430790 | Prepare for anesthesia |
20 °C refrigerator | New-fly group | BCD-213K | Store drugs |
4 °C refrigerator | New-fly group | BCD-213K | Store drugs |
Adobe illustrator cc2020 | Adobe | Process images | |
blue back liquid | Beijing Chemical Works | tissue staining | |
clean bench | Suzhou Sujie Purifying Equipment Co.,Ltd. | Bleomycin preparation | |
differentiation fluid | Beijing Chemical Works | tissue staining | |
Electronic balance | METTLER TOLEDO | AA-160 | Prepare for anesthesia |
eosin stain | Beijing Yili Fine Chemicals Co,Ltd. | tissue staining | |
Heating pad | HIDOM | Mice incubation | |
hematoxylin stain | Beijing Yili Fine Chemicals Co,Ltd. | tissue staining | |
phosphate buffered saline (PBS) buffer | Hyclone | SH30256.01 | Clean lung tissue |
Photoshop drawing software | Adobe | Process images | |
SCIREQ INEXPOSE | EMKA Biotech Beijing Co.,Ltd. | Atomizing device | |
Upright fluorescence microscope | Olympus | BX53 | Observe the slice |
Explore More Articles
This article has been published
Video Coming Soon
ABOUT JoVE
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved