Un modello murino di fibrosi polmonare indotta dalla nebulizzazione nasale di bleomicina

Summary

Vari modelli animali di fibrosi polmonare sono stati stabiliti utilizzando la bleomicina per chiarire la patogenesi della fibrosi polmonare e trovare nuovi bersagli farmacologici. Tuttavia, la maggior parte dei modelli di fibrosi polmonare mirati al tessuto polmonare hanno una somministrazione irregolare del farmaco. Qui, proponiamo un modello di fibrosi polmonare uniforme indotta dalla nebulizzazione nasale di bleomicina.

Abstract

La fibrosi polmonare è caratteristica di diverse malattie polmonari umane che derivano da varie cause. Dato che le opzioni di trattamento sono piuttosto limitate, i modelli murini continuano ad essere uno strumento importante per lo sviluppo di nuove strategie antifibrotiche. In questo studio, la somministrazione intrapolmonare di bleomicina (BLM) viene effettuata mediante nebulizzazione nasale per creare un modello murino di fibrosi polmonare che imita da vicino le caratteristiche cliniche della malattia. I topi C57BL/6 hanno ricevuto BLM (7 U/mL, 30 min/die) mediante nebulizzazione nasale per 3 giorni consecutivi e sono stati sacrificati il giorno 9, 16 o 23 per osservare i cambiamenti infiammatori e fibrotici nel tessuto polmonare. Il BLM aerosolizzato nasale ha preso di mira direttamente i polmoni, provocando infiammazione polmonare e fibrosi diffuse e uniformi. Pertanto, abbiamo generato con successo un modello murino sperimentale di fibrosi polmonare umana tipica. Questo metodo potrebbe essere facilmente utilizzato per studiare gli effetti della somministrazione di vari aerosol nasali sulla fisiopatologia polmonare e convalidare nuovi trattamenti antinfiammatori e antifibrotici.

Introduction

La fibrosi polmonare è un processo patologico progressivo in cui l'eccessiva deposizione di componenti della matrice extracellulare, principalmente il collagene di tipo I, nell'interstizio dei polmoni porta a una compromissione della funzione polmonare¹. La fisiopatologia della fibrosi polmonare è complessa e le opzioni di trattamento sono attualmente piuttosto limitate. I modelli murini rimangono uno strumento importante per studiare i meccanismi patogenetici che contribuiscono all'insorgenza e alla progressione della malattia, nonché nuove strategie per lo sviluppo di farmaci.

Protocol

Il Comitato per gli studi sugli animali dell'Ospedale dell'amicizia Cina-Giappone (Pechino, Cina) ha approvato tutte le procedure che coinvolgono i topi che sono state eseguite nell'ambito di questo studio (NO.190108). I topi sono stati tenuti nella stanza sterile degli animali dell'Istituto di ricerca medica clinica dell'amicizia Cina-Giappone, con una temperatura ambiente di 20-25 °C, umidità relativa del 40%-70%, intensità della luce animale di 15-20 LX e alternanza di luce e buio .......

Discussion

L'iniezione intratracheale di bleomicina provoca una risposta infiammatoria acuta e fibrotica in entrambi i polmoni e può essere considerata un approccio efficace per stabilire un modello murino sperimentale di malattia polmonare interstiziale umana. La somministrazione intratracheale è la via di somministrazione più comunemente utilizzata 2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
bleomycin	Bioway/Nippon Kayaku Co Ltd	DP721	Fibrosis model drugs
0.9% saline for injection	Baxter Healthcare(Tianjin)Co.,Ltd.		Bleomycin preparation
1 mL syringe	BD	300481	Anesthetize animals
10% neutral formalin buffer	TechaLab Biotech Company		Fix lung tissue
15 mL centrifuge tube	corning	430790	Prepare for anesthesia
20 °C refrigerator	New-fly group	BCD-213K	Store drugs
4 °C refrigerator	New-fly group	BCD-213K	Store drugs
Adobe illustrator cc2020	Adobe		Process images
blue back liquid	Beijing Chemical Works		tissue staining
clean bench	Suzhou Sujie Purifying Equipment Co.,Ltd.		Bleomycin preparation
differentiation fluid	Beijing Chemical Works		tissue staining
Electronic balance	METTLER TOLEDO	AA-160	Prepare for anesthesia
eosin stain	Beijing Yili Fine Chemicals Co,Ltd.		tissue staining
Heating pad	HIDOM		Mice incubation
hematoxylin stain	Beijing Yili Fine Chemicals Co,Ltd.		tissue staining
phosphate buffered saline (PBS) buffer	Hyclone	SH30256.01	Clean lung tissue
Photoshop drawing software	Adobe		Process images
SCIREQ INEXPOSE	EMKA Biotech Beijing Co.,Ltd.		Atomizing device
Upright fluorescence microscope	Olympus	BX53	Observe the slice