Мышиная модель легочного фиброза, вызванного распылением назального блеомицина

Summary

Были созданы различные животные модели легочного фиброза с использованием блеомицина для уточнения патогенеза легочного фиброза и поиска новых мишеней для лекарств. Тем не менее, большинство моделей легочного фиброза, нацеленных на легочную ткань, имеют неравномерное введение препарата. В данной работе мы предлагаем модель равномерного легочного фиброза, вызванного назальной небулизацией блеомицина.

Abstract

Фиброз легких характерен для нескольких заболеваний легких человека, которые возникают по различным причинам. Учитывая, что варианты лечения довольно ограничены, мышиные модели продолжают оставаться важным инструментом для разработки новых антифибротических стратегий. В этом исследовании внутрилегочное введение блеомицина (BLM) осуществляется путем небулизации носа для создания мышиной модели легочного фиброза, которая точно имитирует клинические характеристики заболевания. Мыши C57BL/6 получали BLM (7 ЕД/мл, 30 мин/сут) путем небулизации носа в течение 3 дней подряд и были умерщвлены на 9, 16 или 23 день для наблюдения за воспалительными и фиброзными изменениями в легочной ткани. Назальный аэрозольный BLM был направлен непосредственно на легкие, что приводило к широкому и равномерному воспалению легких и фиброзу. Таким образом, мы успешно создали экспериментальную мышиную модель типичного легочного фиброза человека. Этот метод может быть легко использован для изучения влияния введения различных назальных аэрозолей на патофизиологию легких и валидации новых противовоспалительных и антифибротических методов лечения.

Introduction

Легочный фиброз – это прогрессирующий патологический процесс, при котором чрезмерное отложение компонентов внеклеточного матрикса, в первую очередь коллагена I типа, в интерстиции легких приводит к нарушению функции легких¹. Патофизиология легочного фиброза сложна, и возможности лечения в настоящее время весьма ограничены. Мышиные модели остаются важным инструментом для изучения патогенетических механизмов, способствующих возникновению и прогрессированию заболевания, а также новых стратегий разработки лекарств.

Различные животные модели легочного фиброза основан....

Protocol

Комитет по исследованиям на животных Больницы китайско-японской дружбы (Пекин, Китай) одобрил все процедуры на мышах, которые были выполнены в рамках этого исследования (NO190108). Мышей содержали в стерильном помещении для животных Китайско-японского института клиничес?.......

Discussion

Интратрахеальная инъекция блеомицина приводит к острой воспалительной и фиброзной реакции в обоих легких и может считаться эффективным подходом к созданию экспериментальной мышиной модели интерстициального заболевания легких человека. Интратрахеальное введение .......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
bleomycin	Bioway/Nippon Kayaku Co Ltd	DP721	Fibrosis model drugs
0.9% saline for injection	Baxter Healthcare(Tianjin)Co.,Ltd.		Bleomycin preparation
1 mL syringe	BD	300481	Anesthetize animals
10% neutral formalin buffer	TechaLab Biotech Company		Fix lung tissue
15 mL centrifuge tube	corning	430790	Prepare for anesthesia
20 °C refrigerator	New-fly group	BCD-213K	Store drugs
4 °C refrigerator	New-fly group	BCD-213K	Store drugs
Adobe illustrator cc2020	Adobe		Process images
blue back liquid	Beijing Chemical Works		tissue staining
clean bench	Suzhou Sujie Purifying Equipment Co.,Ltd.		Bleomycin preparation
differentiation fluid	Beijing Chemical Works		tissue staining
Electronic balance	METTLER TOLEDO	AA-160	Prepare for anesthesia
eosin stain	Beijing Yili Fine Chemicals Co,Ltd.		tissue staining
Heating pad	HIDOM		Mice incubation
hematoxylin stain	Beijing Yili Fine Chemicals Co,Ltd.		tissue staining
phosphate buffered saline (PBS) buffer	Hyclone	SH30256.01	Clean lung tissue
Photoshop drawing software	Adobe		Process images
SCIREQ INEXPOSE	EMKA Biotech Beijing Co.,Ltd.		Atomizing device
Upright fluorescence microscope	Olympus	BX53	Observe the slice