Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • Representative Results
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

Были созданы различные животные модели легочного фиброза с использованием блеомицина для уточнения патогенеза легочного фиброза и поиска новых мишеней для лекарств. Тем не менее, большинство моделей легочного фиброза, нацеленных на легочную ткань, имеют неравномерное введение препарата. В данной работе мы предлагаем модель равномерного легочного фиброза, вызванного назальной небулизацией блеомицина.

Abstract

Фиброз легких характерен для нескольких заболеваний легких человека, которые возникают по различным причинам. Учитывая, что варианты лечения довольно ограничены, мышиные модели продолжают оставаться важным инструментом для разработки новых антифибротических стратегий. В этом исследовании внутрилегочное введение блеомицина (BLM) осуществляется путем небулизации носа для создания мышиной модели легочного фиброза, которая точно имитирует клинические характеристики заболевания. Мыши C57BL/6 получали BLM (7 ЕД/мл, 30 мин/сут) путем небулизации носа в течение 3 дней подряд и были умерщвлены на 9, 16 или 23 день для наблюдения за воспалительными и фиброзными изменениями в легочной ткани. Назальный аэрозольный BLM был направлен непосредственно на легкие, что приводило к широкому и равномерному воспалению легких и фиброзу. Таким образом, мы успешно создали экспериментальную мышиную модель типичного легочного фиброза человека. Этот метод может быть легко использован для изучения влияния введения различных назальных аэрозолей на патофизиологию легких и валидации новых противовоспалительных и антифибротических методов лечения.

Introduction

Легочный фиброз – это прогрессирующий патологический процесс, при котором чрезмерное отложение компонентов внеклеточного матрикса, в первую очередь коллагена I типа, в интерстиции легких приводит к нарушению функции легких1. Патофизиология легочного фиброза сложна, и возможности лечения в настоящее время весьма ограничены. Мышиные модели остаются важным инструментом для изучения патогенетических механизмов, способствующих возникновению и прогрессированию заболевания, а также новых стратегий разработки лекарств.

Различные животные модели легочного фиброза основан....

Protocol

Комитет по исследованиям на животных Больницы китайско-японской дружбы (Пекин, Китай) одобрил все процедуры на мышах, которые были выполнены в рамках этого исследования (NO190108). Мышей содержали в стерильном помещении для животных Китайско-японского института клиничес?.......

Representative Results

Повреждение легких было вызвано распылением BLM, а контрольные животные были распылены тем же объемом нормального физиологического раствора. Мышей распыляли один раз в день в течение 3 дней по 30 минут в день, используя концентрацию BLM 7 Ед/мл. Мышей приносили в жертву на 9.......

Discussion

Интратрахеальная инъекция блеомицина приводит к острой воспалительной и фиброзной реакции в обоих легких и может считаться эффективным подходом к созданию экспериментальной мышиной модели интерстициального заболевания легких человека. Интратрахеальное введение .......

Acknowledgements

Работа выполнена при поддержке Национального фонда естественных наук Китая (No 92068108).

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
 bleomycinBioway/Nippon Kayaku Co Ltd DP721Fibrosis model drugs
0.9% saline for injectionBaxter Healthcare(Tianjin)Co.,Ltd.Bleomycin preparation
1 mL syringeBD300481Anesthetize animals
10% neutral formalin bufferTechaLab Biotech CompanyFix lung tissue
15 mL centrifuge tubecorning430790Prepare for anesthesia
20 °C refrigeratorNew-fly groupBCD-213KStore drugs
4 °C refrigeratorNew-fly groupBCD-213KStore drugs
Adobe illustrator cc2020AdobeProcess images
blue back liquidBeijing Chemical Workstissue staining
clean benchSuzhou Sujie Purifying Equipment Co.,Ltd.Bleomycin preparation
differentiation fluidBeijing Chemical Workstissue staining
Electronic balanceMETTLER TOLEDOAA-160Prepare for anesthesia
eosin stainBeijing Yili Fine Chemicals Co,Ltd.tissue staining
Heating padHIDOMMice incubation
hematoxylin stainBeijing Yili Fine Chemicals Co,Ltd.tissue staining
phosphate buffered saline (PBS) bufferHycloneSH30256.01Clean lung tissue
Photoshop drawing softwareAdobeProcess images
SCIREQ INEXPOSEEMKA Biotech Beijing Co.,Ltd.Atomizing device
Upright fluorescence microscopeOlympusBX53Observe the slice

References

  1. Raghu, G., et al. Diagnosis of idiopathic pulmonary fibrosis. An official ATS/ERS/JRS/ALAT clinical practice guideline. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 198 (5), e44-e68 (2018).
  2. Moore, B. B., Hogaboam, C. M.

Explore More Articles

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved