In vivo Detección de permeabilidad vascular en glándula submandibular de ratón

La saliva juega un papel importante en la salud oral y general. La función de barrera endotelial intacta de los vasos sanguíneos permite la secreción de saliva, mientras que la disfunción de la barrera endotelial está relacionada con muchos trastornos secretores de las glándulas salivales. El presente protocolo describe un método de detección de permeabilidad paracelular in vivo para evaluar la función de las uniones estrechas endoteliales (TJ) en glándulas submandibulares de ratón (SMG). Primero, se inyectaron dextranos marcados con fluorescencia con diferentes pesos moleculares (4 kDa, 40 kDa o 70 kDa) en las venas angulares de ratones. Posteriormente, el SMG unilateral se diseccionó y fijó en el soporte personalizado bajo un microscopio de escaneo láser de dos fotones, y luego se capturaron imágenes de vasos sanguíneos, acinos y conductos. Utilizando este método, se monitorizó la fuga dinámica en tiempo real de los trazadores de diferentes tamaños de los vasos sanguíneos hacia los lados basales de los acinos e incluso a través del epitelio acinar hacia los conductos para evaluar la alteración de la función de barrera endotelial en condiciones fisiológicas o fisiopatológicas.