Formando, Confinando e Observando Nemática Ativa Baseada em Microtúbulos

A formação de fases ativas baseadas em biopolímeros tornou-se uma técnica importante para pesquisadores interessados em explorar o campo emergente de cristais líquidos ativos e seus possíveis papéis na biologia celular. Esses novos sistemas consistem em subunidades auto-dirigidas que consomem energia localmente, produzindo um fluido dinâmico fora de equilíbrio. Para formar a fase de cristal líquido ativo descrita neste relatório, componentes proteicos purificados, incluindo biopolímeros e motores moleculares, são combinados, e a fase nemática ativa se forma espontaneamente na presença de trifosfato de adenosina (ATP). Para observar o estado nemático, o material deve ser confinado em uma geometria adequada para microscopia em uma densidade suficientemente alta. Este artigo descreve dois métodos diferentes para a formação de uma fase nemática ativa usando microtúbulos e motores de cinesina: montagem de uma camada ativa bidimensional em uma interface óleo e água e montagem sob uma camada de óleo usando um poço elastomérico. Técnicas para inserir o material ativo em pequenos poços de diferentes formas também são descritas.