जन्मजात प्रतिरक्षा कोशिका मृत्यु का आकलन करने के लिए कैसपेस सक्रियण का मूल्यांकन

जन्मजात प्रतिरक्षा रोगजनकों और बाँझ अपमान के जवाब में रक्षा की महत्वपूर्ण पहली पंक्ति प्रदान करती है। इस प्रतिक्रिया का एक प्रमुख यंत्रवत घटक संक्रमित या क्षतिग्रस्त कोशिकाओं को खत्म करने और प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं का प्रचार करने के लिए जन्मजात प्रतिरक्षा क्रमादेशित कोशिका मृत्यु (पीसीडी) की शुरुआत है। हालांकि, अतिरिक्त पीसीडी सूजन और विकृति से जुड़ा हुआ है। इसलिए, पीसीडी के सक्रियण और विनियमन को समझना जन्मजात प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं को चिह्नित करने और रोग स्पेक्ट्रम में नए चिकित्सीय लक्ष्यों की पहचान करने का एक केंद्रीय पहलू है।

यह प्रोटोकॉल कैसपेस की निगरानी करके जन्मजात प्रतिरक्षा पीसीडी सक्रियण को चिह्नित करने के तरीके प्रदान करता है, सिस्टीन-निर्भर प्रोटीज का एक परिवार जो अक्सर एपोप्टोसिस, पाइरोप्टोसिस, नेक्रोप्टोसिस और पीएनोप्टोसिस सहित विभिन्न पीसीडी मार्गों से जुड़े होते हैं। प्रारंभिक रिपोर्टों में कैसपेज़ -2, कैसपेज़ -8, कैसपेज़ -9, और कैसपेज़ -10 को एपोप्टोसिस में प्रभावक कैसपेज़ के रूप में सर्जक कैसपेज़ और कैसपेज़ -3, कैसपेज़ -6 और कैस्पेज़ -7 के रूप में चित्रित किया गया था, जबकि बाद के अध्ययनों में भड़काऊ कैसपेस, कैसपेज़ -1, कैसपेज़ -4, कैसपेज़ -5, और कैसपेज़ -11, ड्राइव पाइरोप्टोसिस पाया गया। अब यह ज्ञात है कि पहले से परिभाषित पीसीडी मार्गों में कैसपेस और अन्य जन्मजात प्रतिरक्षा और कोशिका मृत्यु अणुओं के बीच व्यापक क्रॉसस्टॉक है, जो जन्मजात प्रतिरक्षा और पीसीडी की यांत्रिक समझ में एक महत्वपूर्ण ज्ञान अंतर की पहचान करता है और पीएनोप्टोसिस के लक्षण वर्णन की ओर जाता है। पीएनोप्टोसिस एक अद्वितीय जन्मजात प्रतिरक्षा भड़काऊ पीसीडी मार्ग है जो पीएनोप्टोसोम कॉम्प्लेक्स द्वारा विनियमित होता है, जो अन्य कोशिका मृत्यु मार्गों से कैसपेस सहित घटकों को एकीकृत करता है।

यहां, विभिन्न उत्तेजनाओं के जवाब में कैसपेस के सक्रियण का आकलन करने के तरीके प्रदान किए जाते हैं। ये विधियां इन विट्रो और विवो दोनों में पीसीडी मार्गों के लक्षण वर्णन की अनुमति देती हैं, क्योंकि सक्रिय कैसपेस प्रोटियोलिटिक दरार से गुजरते हैं जिन्हें इष्टतम एंटीबॉडी और ब्लोटिंग स्थितियों का उपयोग करके पश्चिमी सोख्ता द्वारा देखा जा सकता है। एक प्रोटोकॉल और वेस्टर्न ब्लॉटिंग वर्कफ़्लो स्थापित किया गया है जो एक ही सेलुलर आबादी से कई कैसपेस के सक्रियण के मूल्यांकन की अनुमति देता है, जो पीसीडी प्रक्रियाओं का व्यापक लक्षण वर्णन प्रदान करता है। इस पद्धति को विकास, होमियोस्टेसिस, संक्रमण, सूजन और कैंसर में अनुसंधान क्षेत्रों में लागू किया जा सकता है ताकि स्वास्थ्य और बीमारी में सेलुलर प्रक्रियाओं में पीसीडी मार्गों का मूल्यांकन किया जा सके।