कैंडिडा अल्बिकन्स के खिलाफ पेप्टाइड्स की एंटिफंगल गतिविधि की मात्रा निर्धारित करना

कैंडिडा अल्बिकन्स के लिए एंटिफंगल संवेदनशीलता परीक्षण करने के पारंपरिक तरीके समय लेने वाले हैं और मात्रात्मक परिणामों की कमी है। उदाहरण के लिए, एक सामान्य दृष्टिकोण आगर प्लेटों पर एंटिफंगल अणुओं की विभिन्न सांद्रता के साथ इलाज की जाने वाली प्लेटिंग कोशिकाओं पर निर्भर करता है और फिर अणु एकाग्रता और विकास निषेध के बीच संबंध निर्धारित करने के लिए कॉलोनियों की गिनती करता है। इस विधि को कॉलोनियों की गिनती के लिए कई प्लेटों और पर्याप्त समय की आवश्यकता होती है। एक और सामान्य दृष्टिकोण विकास को रोकने के लिए आवश्यक न्यूनतम एकाग्रता की पहचान करने के लिए एंटिफंगल एजेंटों के साथ इलाज की गई संस्कृतियों का नेत्रहीन निरीक्षण करके प्लेटों और कॉलोनियों की गिनती को समाप्त करता है; हालांकि, दृश्य निरीक्षण केवल गुणात्मक परिणाम उत्पन्न करता है, और उप-निरोधात्मक सांद्रता में विकास पर जानकारी खो जाती है। यह प्रोटोकॉल एंटीफंगल पेप्टाइड्स के लिए सी अल्बिकन्स की संवेदनशीलता को मापने के लिए एक विधि का वर्णन करता है। संस्कृतियों के ऑप्टिकल घनत्व माप पर भरोसा करके, विधि विभिन्न पेप्टाइड सांद्रता पर संस्कृति विकास पर मात्रात्मक परिणाम प्राप्त करने के लिए आवश्यक समय और सामग्री को कम करती है। पेप्टाइड्स के साथ कवक का इनक्यूबेशन एक उपयुक्त बफर का उपयोग करके 96-वेल प्लेट में किया जाता है, जिसमें नियंत्रण कोई विकास निषेध और पूर्ण विकास निषेध का प्रतिनिधित्व नहीं करता है। पेप्टाइड के साथ इनक्यूबेशन के बाद, परिणामस्वरूप सेल निलंबन पेप्टाइड गतिविधि को कम करने के लिए पतला हो जाता है और फिर रात भर उगाया जाता है। रात भर के विकास के बाद, प्रत्येक कुएं के ऑप्टिकल घनत्व को मापा जाता है और प्रत्येक पेप्टाइड एकाग्रता पर परिणामी विकास अवरोध की गणना करने के लिए सकारात्मक और नकारात्मक नियंत्रणों की तुलना की जाती है। इस परख का उपयोग करने वाले परिणाम आगर प्लेटों पर संस्कृतियों को चढ़ाने की पारंपरिक विधि का उपयोग करने वाले परिणामों के बराबर हैं, लेकिन यह प्रोटोकॉल प्लास्टिक कचरे और कॉलोनियों की गिनती पर खर्च किए गए समय को कम करता है। यद्यपि इस प्रोटोकॉल के अनुप्रयोगों ने एंटिफंगल पेप्टाइड्स पर ध्यान केंद्रित किया है, विधि ज्ञात या संदिग्ध एंटिफंगल गतिविधि वाले अन्य अणुओं के परीक्षण पर भी लागू होगी।