항체 의존성 세포 독성 변형 화합물의 식별을 위한 High-content screening assay

항원 특이 항체 또는 면역 관문 억제제를 사용한 면역 요법은 유방암 치료에 혁명을 일으켰습니다. 표피 성장 인자 수용체 HER2를 발현하는 유방암 세포는 항-HER-2 항체 트라스투주맙에 의해 표적화될 수 있다. 항체 의존성 세포성 세포독성(ADCC)은 HER-2의 항종양 작용에 연루된 중요한 기전이다. 암세포에 결합된 트라스투주맙은 ADCC 이펙터 세포(예: 자연 살해(NK) 세포, 대식세포 및 과립구)의 Fc 수용체에 의해 인식되어 암세포 사멸을 유도하는 이러한 면역 세포의 세포독성 활성을 유발할 수 있습니다. 우리는 high-content screening을 통해 새로운 ADCC 조절제 화합물을 식별하기 위해 ADCC의 정량화를 위한 이미지 기반 분석을 개발하기 시작했습니다. 분석에서 JIMT-1 유방암 세포를 과발현하는 HER2는 트라스투주맙의 존재 하에 NK-92 세포와 공동 배양되고 표적 세포 사멸은 자동 현미경 및 정량적 이미지 분석에 의해 정량화됩니다. 표적 세포는 EGFP 형광에 따라 이펙터 세포와 구별됩니다. 우리는 ADCC 조절제 약물을 식별하기 위해 분석에서 화합물 라이브러리를 테스트할 수 있는 방법을 보여줍니다. 이를 위해 실험실 선반에서 무작위로 선택된 정밀 화학 물질을 사용하여 화합물 라이브러리 테스트 플레이트를 설정했습니다. NK 세포 이동 및 탈과립을 방해할 것으로 예상되는 3가지 미세소관 불안정화 화합물(콜히친, 빈크리스틴, 포도필로톡신)도 테스트 라이브러리에 포함되었습니다. 테스트 스크린은 세 가지 양성 대조 화합물을 모두 적중으로 식별하여 화학 라이브러리에서 ADCC 변형 약물을 식별하는 방법의 적합성을 입증했습니다. 이 분석을 통해 화합물 라이브러리 스크리닝을 수행하여 항암 면역 요법을 받는 환자의 치료를 위한 보조 치료제로 사용할 수 있는 ADCC 강화 화합물을 확인할 수 있습니다. 또한, 상기 방법은 또한 상이한 적응증에 대해 암 환자에 의해 복용되는 치료 약물의 임의의 바람직하지 않은 ADCC-억제 부작용을 확인하는데 사용될 수 있다.