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Genetics

ई कोलाई में प्राकृतिक वैवाहिक प्लास्मिड द्वारा मध्यस्थ क्षैतिज जीन हस्तांतरण का पता लगाना

Published: March 24th, 2023

DOI:

10.3791/64523

1School of Biological Sciences, University of California Irvine, 2Department of Microbiology & Environmental Toxicology, University of California Santa Cruz

संयुग्मन ग्राम-नकारात्मक बैक्टीरिया में क्षैतिज जीन हस्तांतरण की सुविधा प्रदान करने वाले मुख्य तंत्रों में से एक का प्रतिनिधित्व करता है। यह काम एक उदाहरण के रूप में दो स्वाभाविक रूप से पाए जाने वाले प्लास्मिड का उपयोग करके, स्वाभाविक रूप से होने वाले वैवाहिक प्लास्मिड के जुटाने के अध्ययन के तरीकों का वर्णन करता है। ये प्रोटोकॉल दाता, प्राप्तकर्ता और वैवाहिक प्लास्मिड में चयन योग्य मार्करों की अंतर उपस्थिति पर निर्भर करते हैं। विशेष रूप से, वर्णित विधियों में 1) प्राकृतिक वैवाहिक प्लास्मिड की पहचान, 2) ठोस संस्कृति में संयुग्मन दरों की मात्रा का परिमाणीकरण, और 3) पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) द्वारा ट्रांसकोन्जुगेंट प्राप्तकर्ताओं में एंटीबायोटिक प्रतिरोध जीन और प्लास्मिड रिप्लिकॉन प्रकारों का नैदानिक पता लगाना शामिल है। यहां वर्णित प्रोटोकॉल क्षैतिज जीन हस्तांतरण के विकासवादी पारिस्थितिकी का अध्ययन करने के संदर्भ में विकसित किए गए हैं, ताकि पर्यावरण में पाए जाने वाले बैक्टीरिया में एंटीबायोटिक-प्रतिरोध जीन ले जाने वाले वैवाहिक प्लास्मिड की उपस्थिति की जांच की जा सके। संस्कृति में इन प्रयोगों में देखे गए वैवाहिक प्लास्मिड का कुशल हस्तांतरण सामान्य रूप से क्षैतिज जीन हस्तांतरण और विशेष रूप से एंटीबायोटिक प्रतिरोध के प्रसार को बढ़ावा देने वाले तंत्र के रूप में संयुग्मन की जैविक प्रासंगिकता पर प्रकाश डालता है।

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