एक्स वीवो यूरोथेलियल कोशिकाओं में यांत्रिक रूप से सक्रिय सीए^{2 + ट्रांसिएंट्स} का विश्लेषण

यांत्रिक रूप से सक्रिय आयन चैनल जैविक ट्रांसड्यूसर हैं जो यांत्रिक उत्तेजनाओं जैसे खिंचाव या कतरनी बलों को विद्युत और जैव रासायनिक संकेतों में परिवर्तित करते हैं। स्तनधारियों में, स्पर्श संवेदना, श्रवण, लाल रक्त कोशिका की मात्रा विनियमन, बेसल रक्तचाप विनियमन और मूत्र मूत्राशय की परिपूर्णता की अनुभूति के रूप में विविध प्रक्रियाओं में बाहरी और आंतरिक उत्तेजनाओं का पता लगाने के लिए यांत्रिक रूप से सक्रिय चैनल आवश्यक हैं। जबकि पैच-क्लैंप तकनीक का उपयोग करके इन विट्रो सेटिंग में यांत्रिक रूप से सक्रिय आयन चैनलों के कार्य का बड़े पैमाने पर अध्ययन किया गया है, उनके मूल वातावरण में उनके कार्य का आकलन करना एक कठिन काम बना हुआ है, अक्सर इन चैनलों की अभिव्यक्ति की साइटों तक सीमित पहुंच के कारण (जैसे, अभिवाही टर्मिनल, मर्केल कोशिकाएं, बैरोसेप्टर्स, और गुर्दे की नलिकाएं) या पैच-क्लैंप तकनीक को लागू करने में कठिनाइयों (जैसे, यूरोथेलियल छाता कोशिकाओं की एपिकल सतहें)। यह प्रोटोकॉल एक पूर्व विवो यूरोथेलियल तैयारी में फ्लोरोसेंट सेंसर जीसीएएमपी 5 जी का उपयोग करके यांत्रिक रूप से उत्पन्न सीए^{2 +} क्षणिकों का आकलन करने की प्रक्रिया का वर्णन करता है, एक तकनीक जिसे अन्य देशी ऊतक तैयारी में यांत्रिक रूप से उत्पन्न सीए^{2 +} घटनाओं के अध्ययन के लिए आसानी से अनुकूलित किया जा सकता है।