A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
הפרוטוקול הנוכחי מתאר שיטה להעברת תרופות וחומרים משני ביטוי גנים באופן פריווסקולרי בעובר מתפתח ברחם . חשוב לציין, ניתן למדוד את ההשפעה של תרופות/סוכנים על זרימת הדם עם התקדמות ההריון.
יכולתו של אורגניזם לשמור על זרימת דם קבועה למוח בתגובה לעליות פתאומיות בלחץ הדם המערכתי (BP) ידועה בשם ויסות עצמי מוחי (CAR), המתרחש בעורק התרדמה. בניגוד ליילודים במועד מלא, יילודים מוקדמים אינם מסוגלים להפחית את זרימת הדם במוח (CBF) בתגובה לעלייה בBP המערכתי. אצל פגים, זה חושף את כלי הדם המוחיים השבירים ללחצי זילוח גבוהים, מה שמוביל לקרע שלהם ולנזק מוחי. מחקרי Ex vivo באמצעות מיוגרפיה של חוטים הראו כי עורקי התרדמה מעוברים בטווח הקרוב מתכווצים בתגובה להפעלת קולטני אלפא 1 אדרנרגיים. תגובה זו קהה בעובר הפג. לפיכך, כדי לבחון את התפקיד של alpha1-AR in vivo, מוצגת כאן גישה חדשנית לקביעת ההשפעות של תרופות על מקטע עורקי התרדמה in vivo בעובר שחלתי במהלך ההתקדמות ההתפתחותית של ההריון. הנתונים המוצגים מדגימים מדידה בו זמנית של זרימת הדם ולחץ הדם בעובר. מערכת המסירה ההיקפית יכולה לשמש לביצוע מחקר ארוך טווח במשך מספר ימים. יישומים נוספים לשיטה זו יכולים לכלול מערכות העברת נגיפים כדי לשנות את ביטוי הגנים בקטע של עורק התרדמה. שיטות אלה יכולות להיות מיושמות על כלי דם אחרים באורגניזם הגדל ברחם , כמו גם באורגניזמים בוגרים.
לידה גורמת ללחץ על העובר, ויש עלייה ניכרת ברמות קטכולאמין, הורמון הלחץ העיקרי 1,2. זה מעלה את BP המערכתי, ואם לחץ זה מועבר לנימי המוח השבירים דרך עורקי התרדמה, זה יכול להוביל לקרעשלהם 3,4,5. נחשולים ב- BP מערכתי נמנעים מלהגיע למוח על ידי התכווצות עורקי התרדמה בעובר לטווח מלא. עם זאת, מנגנון זה אינו מפותח בפגים, וזה אחראי לסבירות גבוהה משמעותית לנזק מוחי בפגים 4,5.
כיום לא קיימת שיטה מתאימה לבחינת הבשלת המסלולים המעורבים בוו....
לצורך המחקר הנוכחי התקבל אישור לניסויים בבעלי חיים מהוועדה לטיפול ושימוש בבעלי חיים של אוניברסיטת אריזונה. במחקר הנוכחי נעשה שימוש באבני קולומביה-רמבוייה בהריון בגילאי 2-4 שנים. החיות נלקחו מיחידת הכבשים של אוניברסיטת אריזונה.
1. תחזוקת בעלי חיים
2. הכנת החומר
כדי לבחון את המניפולציה המקומית in vivo של זרימת הדם, 1 מ"ל של פנילפרין (10 מיקרומטר), אגוניסטα 1-AR, ניתן לחלל הפריווסקולרי של עורק התרדמה על ידי קטטר עירוי חיצוני כדי לקבוע את ההשפעה על זרימת הדם המקומית של התרדמה ואת ההשפעה על לחץ הדם המערכתי. איור 1A מדגים ירידה משמעות?.......
נכון לעכשיו, לא קיימת שיטה לבחינת התכווצות כלי הדם והתרחבותם in vivo בתגובה לתרכובות תרופות ומניפולציה גנטית. כסטנדרט בתחום, זרימת הדם in vivo נמדדת על ידי בדיקות זרימת דופלר, מיקרוספרות ומולקולות רדיואקטיביות כגון מים טריטיים. עם זאת, כדי לתפעל את תפקודי הקולטנים או את האיתות במורד הז.......
למחברים אין גילויים.
כספים פנימיים מאוניברסיטת אריזונה שימשו למחקרים אלה.
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
Aaron Bovie Electrosurgical Cautery | Henry Schein, Inc | 5905974 | |
Aaron Bovie Electrosurgical Generator | Henry Schein, Inc | 1229913 | |
Alfalfa Pellets | Sacate Pellet Mills, Inc. Maricopa AZ | 100-80 | |
Analog to Digital Converter | ADI Instruments | Powerlab | |
Babcock forceps | Roboz Surgicals | RS8020 | |
Bridge Amplifier | ADI Instruments | Bridge Amplifier | |
Castroviejo scissors | Roboz Surgicals | RS5650SC | |
Diazepam | Henry Schein, Inc | 1278188 | |
Endotracheal Tube | Henry Schein, Inc | 7020408 | |
Flow Probes | Transonic Systems Inc. | MC2PSS-JS-WC100-CRS10-GC, MC3PSS-LS-WC100-CRS10-GC | |
Heparin | Henry Schein, Inc | 1162406 | |
Isoflurane | Henry Schein, Inc | 1182097 | |
Ketamine | Henry Schein, Inc | 1273383 | |
Ketoprofen | Zoetis Inc., Kalamazoo, MI | Ketofen | |
Manifold Pump Tubing | Fisher Scientific | 14-190-508 | |
Metzenbaum scissors | Roboz Surgicals | RS6010 | |
Narkomed 4 Anesthesia Machine | North American Dräger | Narkomed 4 | |
Normal Saline | Fisher Scientific | Z1376 | |
penicillin G procaine suspension | Henry Schein, Inc | 7455874 | |
phenylbutazone | VetOne Boise, ID | 510226 | |
Phenylephrine | Sigma Aldrich Inc. | P1240000 | |
Pivodine Scrub | VetOne | 510094 | Germicidal cleanser |
PowerLab | ADInstruments | Data acquisition hardware device | |
Pulse Oximeter | Amazon Inc. | UT100V | |
Tygon Tubing | Fisher Scientific | ND-100-80 | |
V-Top Surgical Table | VetLine Veterinary Classic Surgery | TSP-4010 | |
Wound Clips | Fisher Scientific | 10-001-024 |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
ABOUT JoVE
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved