Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • Representative Results
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

הפרוטוקול הנוכחי מתאר שיטה להעברת תרופות וחומרים משני ביטוי גנים באופן פריווסקולרי בעובר מתפתח ברחם . חשוב לציין, ניתן למדוד את ההשפעה של תרופות/סוכנים על זרימת הדם עם התקדמות ההריון.

Abstract

יכולתו של אורגניזם לשמור על זרימת דם קבועה למוח בתגובה לעליות פתאומיות בלחץ הדם המערכתי (BP) ידועה בשם ויסות עצמי מוחי (CAR), המתרחש בעורק התרדמה. בניגוד ליילודים במועד מלא, יילודים מוקדמים אינם מסוגלים להפחית את זרימת הדם במוח (CBF) בתגובה לעלייה בBP המערכתי. אצל פגים, זה חושף את כלי הדם המוחיים השבירים ללחצי זילוח גבוהים, מה שמוביל לקרע שלהם ולנזק מוחי. מחקרי Ex vivo באמצעות מיוגרפיה של חוטים הראו כי עורקי התרדמה מעוברים בטווח הקרוב מתכווצים בתגובה להפעלת קולטני אלפא 1 אדרנרגיים. תגובה זו קהה בעובר הפג. לפיכך, כדי לבחון את התפקיד של alpha1-AR in vivo, מוצגת כאן גישה חדשנית לקביעת ההשפעות של תרופות על מקטע עורקי התרדמה in vivo בעובר שחלתי במהלך ההתקדמות ההתפתחותית של ההריון. הנתונים המוצגים מדגימים מדידה בו זמנית של זרימת הדם ולחץ הדם בעובר. מערכת המסירה ההיקפית יכולה לשמש לביצוע מחקר ארוך טווח במשך מספר ימים. יישומים נוספים לשיטה זו יכולים לכלול מערכות העברת נגיפים כדי לשנות את ביטוי הגנים בקטע של עורק התרדמה. שיטות אלה יכולות להיות מיושמות על כלי דם אחרים באורגניזם הגדל ברחם , כמו גם באורגניזמים בוגרים.

Introduction

לידה גורמת ללחץ על העובר, ויש עלייה ניכרת ברמות קטכולאמין, הורמון הלחץ העיקרי 1,2. זה מעלה את BP המערכתי, ואם לחץ זה מועבר לנימי המוח השבירים דרך עורקי התרדמה, זה יכול להוביל לקרעשלהם 3,4,5. נחשולים ב- BP מערכתי נמנעים מלהגיע למוח על ידי התכווצות עורקי התרדמה בעובר לטווח מלא. עם זאת, מנגנון זה אינו מפותח בפגים, וזה אחראי לסבירות גבוהה משמעותית לנזק מוחי בפגים 4,5.

כיום לא קיימת שיטה מתאימה לבחינת הבשלת המסלולים המעורבים בוו....

Protocol

לצורך המחקר הנוכחי התקבל אישור לניסויים בבעלי חיים מהוועדה לטיפול ושימוש בבעלי חיים של אוניברסיטת אריזונה. במחקר הנוכחי נעשה שימוש באבני קולומביה-רמבוייה בהריון בגילאי 2-4 שנים. החיות נלקחו מיחידת הכבשים של אוניברסיטת אריזונה.

1. תחזוקת בעלי חיים

  1. להשיג בעלי חיים מכל חוות כבשים.
  2. להעביר את הביצים למעבדה ב 105 ימים ± 5 ימים עד 137 ימים ± 5 ימים של גיל ההריון (dGA). שמור על הכבשים בטמפרטורה של 22 ° C ± 1 °C (75 °F) בלחות הסביבה. ספקו כדורי אספסת (ראו טבלת חומרים), מלחים ומים עד ליביטום.

2. הכנת החומר

  1. בניית מערכת הצנתרים הפ....

Representative Results

כדי לבחון את המניפולציה המקומית in vivo של זרימת הדם, 1 מ"ל של פנילפרין (10 מיקרומטר), אגוניסטα 1-AR, ניתן לחלל הפריווסקולרי של עורק התרדמה על ידי קטטר עירוי חיצוני כדי לקבוע את ההשפעה על זרימת הדם המקומית של התרדמה ואת ההשפעה על לחץ הדם המערכתי. איור 1A מדגים ירידה משמעות?.......

Discussion

נכון לעכשיו, לא קיימת שיטה לבחינת התכווצות כלי הדם והתרחבותם in vivo בתגובה לתרכובות תרופות ומניפולציה גנטית. כסטנדרט בתחום, זרימת הדם in vivo נמדדת על ידי בדיקות זרימת דופלר, מיקרוספרות ומולקולות רדיואקטיביות כגון מים טריטיים. עם זאת, כדי לתפעל את תפקודי הקולטנים או את האיתות במורד הז.......

Disclosures

למחברים אין גילויים.

Acknowledgements

כספים פנימיים מאוניברסיטת אריזונה שימשו למחקרים אלה.

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Aaron Bovie Electrosurgical CauteryHenry Schein, Inc5905974 
Aaron Bovie Electrosurgical GeneratorHenry Schein, Inc1229913
Alfalfa PelletsSacate Pellet Mills, Inc. Maricopa AZ100-80 
Analog to Digital ConverterADI InstrumentsPowerlab
Babcock forcepsRoboz SurgicalsRS8020
Bridge AmplifierADI InstrumentsBridge Amplifier
Castroviejo scissorsRoboz SurgicalsRS5650SC
DiazepamHenry Schein, Inc1278188
Endotracheal TubeHenry Schein, Inc7020408 
Flow ProbesTransonic Systems Inc.MC2PSS-JS-WC100-CRS10-GC, MC3PSS-LS-WC100-CRS10-GC
HeparinHenry Schein, Inc1162406 
IsofluraneHenry Schein, Inc1182097
KetamineHenry Schein, Inc1273383
KetoprofenZoetis Inc., Kalamazoo, MIKetofen
Manifold Pump TubingFisher Scientific14-190-508
Metzenbaum scissorsRoboz SurgicalsRS6010
Narkomed 4 Anesthesia MachineNorth American Dräger Narkomed 4
Normal SalineFisher ScientificZ1376
penicillin G procaine suspension Henry Schein, Inc7455874
phenylbutazoneVetOne Boise, ID510226
PhenylephrineSigma Aldrich Inc.P1240000
Pivodine ScrubVetOne 510094Germicidal cleanser
PowerLabADInstrumentsData acquisition hardware device
Pulse OximeterAmazon Inc.UT100V 
Tygon TubingFisher ScientificND-100-80
V-Top Surgical TableVetLine Veterinary Classic SurgeryTSP-4010
Wound ClipsFisher Scientific10-001-024

References

  1. Lagercrantz, H., Slotkin, T. A. The "stress" of being born. Scientific American. 254 (4), 100-107 (1986).
  2. Ronca, A. E., Abel, R. A., Ronan, P. J., Renner, K. J., Alberts, J. R. Effects of labor contractions on catec....

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

194CARCBF11 AR

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved