JoVE Logo

Sign In

Abstract

Medicine

Een monstervoorbereiding voor het vangen van eiwitten voor traanproteomics door middel van vloeistofchromatografie-tandem massaspectrometrie

Published: December 1st, 2023

DOI:

10.3791/64617

1Centre for Myopia Research, School of Optometry, The Hong Kong Polytechnic University, 2Centre for Eye and Vision Research (CEVR), 3Research Centre for SHARP Vision (RCSV), The Hong Kong Polytechnic University, 4Research Centre for Chinese Medicine Innovation (RCMI), The Hong Kong Polytechnic University

* These authors contributed equally

Abstract

Traanvocht is een van de gemakkelijk toegankelijke biovloeistoffen die niet-invasief kunnen worden verzameld. Traanproteomics heeft het potentieel om biomarkers te ontdekken voor verschillende oogziekten en aandoeningen. Naar verluidt is de suspensievangkolom een efficiënte en gebruiksvriendelijke workflow voor monstervoorbereiding voor de brede toepassing van stroomafwaartse proteomische analyse. Toch is deze strategie niet goed bestudeerd in de analyse van menselijk traanproteoom. Het huidige protocol beschrijft een geïntegreerde workflow van klinische menselijke traanmonsters tot gezuiverde peptiden voor niet-invasief onderzoek naar traaneiwitbiomarkers met behulp van massaspectrometrie, dat inzicht geeft in ziektebiomarkers en monitoring in combinatie met bioinformatica-analyse. Een monstervoorbereiding voor het vangen van eiwitsuspensie werd toegepast en demonstreerde de ontdekking van traanproteoom met snelle, reproduceerbare en gebruiksvriendelijke procedures, als een universele, geoptimaliseerde monstervoorbereiding voor menselijke traanvloeistofanalyse. Met name de procedure voor het vangen van suspensie presteerde beter dan de monstervoorbereiding in de oplossing in termen van peptideherstel, eiwitidentificatie en kortere monstervoorbereidingstijd.

Explore More Videos

Geneeskunde

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved