Mitokondri ve Lizozom için Floresan Boyalarla Mitopajinin Görselleştirilmesi

Hücrenin güç merkezleri olan mitokondri, biyoenerjetik çalışmalarda, serbest radikal oluşumunda, kalsiyum homeostazında ve apoptozda önemli roller oynamaktadır. Mitofaji, mitokondriyal kalite kontrolün birincil mekanizmasıdır ve genellikle mikroskobik gözlem kullanılarak incelenir, ancak in vivo mitofi tahlillerinin yapılması zordur. Mitofajiyi canlı organelleri görüntüleyerek değerlendirmek, mitokondriyal araştırmalar için alternatif ve gerekli bir yöntemdir. Bu protokol, boyaların yüklenmesi, mitokondri ve lizozomun görselleştirilmesi ve beklenen sonuçlar dahil olmak üzere, hücre perkastı yeşil floresan mitokondri boyası MitoTracker Green ve kırmızı floresan lizozom boyası LysoTracker Red'in canlı hücrelerde kullanılmasına ilişkin prosedürleri açıklar. Canlı hücrelerde mitofajinin değerlendirilmesi için ayrıntılı adımlar ve mikroskop yazılım ayarları hakkında teknik notlar da sağlanmaktadır. Bu yöntem, araştırmacıların canlı hücreli floresan mikroskopi kullanarak mitofajiyi gözlemlemelerine yardımcı olabilir. Ek olarak, mitokondri ve lizozomları ölçmek ve mitokondriyal morfolojiyi değerlendirmek için kullanılabilir.