نظام الزرد Tol2: نهج وراثي معياري ومرن قائم على البوابة

تتميز اضطرابات طيف الكحول الجنيني (FASD) بمجموعة متغيرة للغاية من العيوب الهيكلية والإعاقات المعرفية التي تنشأ بسبب التعرض للإيثانول قبل الولادة. نظرا لعلم الأمراض المعقد ل FASD ، أثبتت النماذج الحيوانية أهميتها لفهمنا الحالي للعيوب التنموية التي يسببها الإيثانول. أثبت الزرد أنه نموذج قوي لفحص العيوب التنموية التي يسببها الإيثانول بسبب الدرجة العالية من الحفاظ على كل من الوراثة والتنمية بين الزرد والبشر. كنظام نموذجي ، تمتلك أسماك الزرد العديد من السمات التي تجعلها مثالية للدراسات التنموية ، بما في ذلك أعداد كبيرة من الأجنة المخصبة خارجيا والتي تكون شفافة وراثيا. وهذا يسمح للباحثين بالتحكم بدقة في توقيت وجرعة التعرض للإيثانول في سياقات جينية متعددة. إحدى الأدوات الوراثية المهمة المتاحة في الزرد هي الجينات المحورة. ومع ذلك ، فإن توليد تركيبات معدلة وراثيا وإنشاء خطوط محورة وراثيا يمكن أن يكون معقدا وصعبا. لمعالجة هذه المشكلة ، أنشأ باحثو الزرد نظام التحوير Tol2 القائم على الترانسبوزون. يستخدم هذا النظام المعياري نهج استنساخ بوابة متعدد المواقع للتجميع السريع للتركيبات المعدلة وراثيا الكاملة القائمة على Tol2. هنا ، نصف صندوق أدوات نظام Tol2 المرن وبروتوكول لتوليد تركيبات معدلة وراثيا جاهزة لجين الزرد المحورة واستخدامها في دراسات الإيثانول.