斑马鱼 Tol2 系统：一种模块化且灵活的基于网关的转基因方法

胎儿酒精谱系障碍 （FASD） 的特征是一组高度可变的结构缺陷和认知障碍，这些缺陷和认知障碍是由于产前乙醇暴露引起的。由于胎儿酒精谱系障碍的复杂病理学，动物模型已被证明对我们目前对乙醇诱导的发育缺陷的理解至关重要。斑马鱼已被证明是检查乙醇诱导的发育缺陷的有力模型，因为斑马鱼和人类之间的遗传和发育高度保守。作为一种模型系统，斑马鱼具有许多属性，使其成为发育研究的理想选择，包括大量遗传可处理和半透明的外部受精胚胎。这使研究人员能够在多种遗传环境中精确控制乙醇暴露的时间和剂量。斑马鱼中可用的一个重要遗传工具是转基因。然而，生成转基因构建体和建立转基因系可能是复杂和困难的。为了解决这个问题，斑马鱼研究人员建立了基于转座子的Tol2转基因系统。该模块化系统使用多位点网关克隆方法快速组装完整的基于Tol2转座子的转基因构建体。在这里，我们描述了灵活的Tol2系统工具箱和用于生成可用于斑马鱼转基因的转基因构建体及其在乙醇研究中的使用的方案。