ज़ेबराफिश टोल 2 सिस्टम: एक मॉड्यूलर और फ्लेक्सिबल गेटवे-आधारित ट्रांसजेनेसिस दृष्टिकोण

भ्रूण अल्कोहल स्पेक्ट्रम विकार (एफएएसडी) संरचनात्मक दोषों और संज्ञानात्मक हानि के एक अत्यधिक परिवर्तनशील सेट की विशेषता है जो प्रसवपूर्व इथेनॉल जोखिम के कारण उत्पन्न होते हैं। एफएएसडी की जटिल विकृति के कारण, पशु मॉडल इथेनॉल-प्रेरित विकास दोषों की हमारी वर्तमान समझ के लिए महत्वपूर्ण साबित हुए हैं। जेब्राफिश और मनुष्यों के बीच आनुवंशिकी और विकास दोनों के संरक्षण के उच्च स्तर के कारण इथेनॉल-प्रेरित विकास दोषों की जांच करने के लिए ज़ेबराफ़िश एक शक्तिशाली मॉडल साबित हुआ है। एक मॉडल प्रणाली के रूप में, ज़ेबराफिश में कई विशेषताएं होती हैं जो उन्हें विकास ता्मक अध्ययनों के लिए आदर्श बनाती हैं, जिसमें बड़ी संख्या में बाहरी निषेचित भ्रूण शामिल हैं जो आनुवंशिक रूप से वापस लेने योग्य और पारभासी हैं। यह शोधकर्ताओं को कई आनुवंशिक संदर्भों में इथेनॉल एक्सपोजर के समय और खुराक को ठीक से नियंत्रित करने की अनुमति देता है। ज़ेबराफ़िश में उपलब्ध एक महत्वपूर्ण आनुवंशिक उपकरण ट्रांसजेनेसिस है। हालांकि, ट्रांसजेनिक संरचनाओं को उत्पन्न करना और ट्रांसजेनिक लाइनों की स्थापना जटिल और कठिन हो सकती है। इस मुद्दे को हल करने के लिए, ज़ेब्राफिश शोधकर्ताओं ने ट्रांसपोसन-आधारित टोल 2 ट्रांसजेनेसिस सिस्टम की स्थापना की है। यह मॉड्यूलर सिस्टम पूर्ण टोल 2 ट्रांसपोसन-आधारित ट्रांसजेनिक संरचनाओं की त्वरित असेंबली के लिए एक मल्टीसाइट गेटवे क्लोनिंग दृष्टिकोण का उपयोग करता है। यहां, हम लचीले टोल 2 सिस्टम टूलबॉक्स और जेब्राफिश ट्रांसजेनेसिस और इथेनॉल अध्ययन में उनके उपयोग के लिए तैयार ट्रांसजेनिक संरचनाओं को उत्पन्न करने के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं।