Humane leversfæroider fra perifert blod til undersøgelser af leversygdomme

Humane leverceller kan danne en tredimensionel (3D) struktur, der er i stand til at vokse i kultur i nogle uger og bevare deres funktionelle kapacitet. På grund af deres natur at klynge i kulturskålene med lave eller ingen klæbende egenskaber danner de aggregater af flere leverceller, der kaldes humane leversfæroider. Dannelsen af 3D-leversfæroider er afhængig af levercellernes naturlige tendens til at aggregere i fravær af et klæbende substrat. Disse 3D-strukturer har bedre fysiologiske reaktioner end celler, som er tættere på et in vivo-miljø . Brug af 3D-hepatocytkulturer har adskillige fordele sammenlignet med klassiske todimensionelle (2D) kulturer, herunder et mere biologisk relevant mikromiljø, arkitektonisk morfologi, der samler naturlige organer samt en bedre forudsigelse vedrørende sygdomstilstand og in vivo-lignende reaktioner på lægemidler. Forskellige kilder kan bruges til at generere sfæroider, som primært levervæv eller udødeliggjorte cellelinjer. 3D-levervævet kan også konstrueres ved hjælp af humane embryonale stamceller (hESC'er) eller inducerede pluripotente stamceller (hiPSC'er) til at udlede hepatocytter. Vi har opnået humane leversfæroider ved hjælp af blodafledte pluripotente stamceller (BD-PSC'er) genereret fra umanipuleret perifert blod ved aktivering af humant membranbundet GPI-bundet protein og differentieret til humane hepatocytter. De BD-PSC'er-afledte humane leverceller og humane leversfæroider blev analyseret ved lysmikroskopi og immunofænotypning ved anvendelse af humane hepatocytmarkører.