小鼠 体内 胎盘靶向CRISPR操作

胎盘是调节和维持子宫 内哺乳动物发育的重要器官。胎盘负责母亲和胎儿之间营养物质和废物的转移以及生长因子和激素的产生和输送。小鼠胎盘遗传操作对于了解胎盘在产前发育中的特定作用至关重要。表达胎盘特异性Cre的转基因小鼠具有不同的有效性，其他胎盘基因操作方法可能是有用的替代方案。本文描述了一种利用CRISPR基因操作直接改变胎盘基因表达的技术，可用于修饰靶基因的表达。使用相对先进的手术方法，怀孕的母亲在胚胎第12.5天（E12.5）进行剖腹手术，并通过玻璃微量移液器将CRISPR质粒输送到单个胎盘中。质粒在每次进样后立即电穿孔。母体恢复后，胎盘和胚胎可以继续发育，直到稍后的时间点进行评估。使用该技术后对胎盘和后代的评估可以确定时间特异性胎盘功能在发育中的作用。这种类型的操作将允许更好地了解胎盘遗传学和功能如何影响多种疾病背景下的胎儿生长和发育。