Agrobacterium tumefaciens-medierad genetisk omvandling av smalbladig groblad

Arter i släktet Plantago har flera unika egenskaper som har lett till att de har anpassats som modellväxter inom olika studier. Bristen på ett genetiskt manipulationssystem förhindrar emellertid en djupgående undersökning av genfunktionen, vilket begränsar mångsidigheten hos detta släkt som modell. Här presenteras ett transformationsprotokoll för Plantago lanceolata, den vanligast studerade Plantago-arten. Med hjälp av Agrobacterium tumefaciens-medierad transformation, 3 veckor gamla rötter av aseptiskt odlade P. lanceolata växter infekterades med bakterier, inkuberas i 2-3 dagar, och sedan överfördes till ett skott induktion medium med lämpligt antibiotikum urval. Skott kom vanligtvis ut från mediet efter 1 månad, och rötter utvecklades 1-4 veckor efter att skotten överfördes till rotinduktionsmediet. Växterna acklimatiserades sedan till en markmiljö och testades för närvaron av en transgen med hjälp av β-glukuronidas (GUS) reporteranalys. Transformationseffektiviteten för den nuvarande metoden är ~ 20%, med två transgena växter som växer fram per 10 rotvävnader som omvandlas. Upprättandet av ett omvandlingsprotokoll för smalbladiga groblad kommer att underlätta antagandet av denna växt som en ny modellart i olika områden.