Monitoraggio bioluminescente della sopravvivenza del trapianto in un modello di trasferimento adottivo del diabete autoimmune nei topi

Il diabete di tipo 1 è caratterizzato dalla distruzione autoimmune delle cellule beta produttrici di insulina del pancreas. Un trattamento promettente per questa malattia è il trapianto di cellule beta derivate da cellule staminali. Le modificazioni genetiche, tuttavia, possono essere necessarie per proteggere le cellule trapiantate dall'autoimmunità persistente. I modelli murini diabetici sono uno strumento utile per la valutazione preliminare delle strategie per proteggere le cellule trapiantate dall'attacco autoimmune. Descritto qui è un metodo minimamente invasivo per il trapianto e l'imaging di innesti cellulari in un modello di trasferimento adottivo del diabete nei topi. In questo protocollo, le cellule della linea cellulare beta pancreatica murina NIT-1 che esprime il transgene luciferasi luc2 della lucciola vengono trapiantate per via sottocutanea in topi immunodeficienti diabetici non obesi (NOD)-gravi immunodeficienti combinati (SCID). Questi topi vengono iniettati simultaneamente per via endovenosa con splenociti da topi NOD spontaneamente diabetici per trasferire l'autoimmunità. Gli innesti vengono ripresi a intervalli regolari tramite imaging bioluminescente non invasivo per monitorare la sopravvivenza cellulare. La sopravvivenza delle cellule mutanti è paragonata a quella delle cellule di controllo trapiantate nello stesso topo.