تمايز الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات إلى مجموعات الجزر المنتجة للأنسولين

يوفر تمايز الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات (hPSCs) إلى خلايا بيتا التي تفرز الأنسولين مادة للتحقيق في وظيفة خلايا بيتا وعلاج مرض السكري. ومع ذلك ، لا تزال هناك تحديات في الحصول على خلايا بيتا المشتقة من الخلايا الجذعية التي تحاكي بشكل كاف خلايا بيتا البشرية الأصلية. بناء على الدراسات السابقة ، تم إنشاء خلايا جزرية مشتقة من hPSC لإنشاء بروتوكول مع تحسين نتائج التمايز والاتساق. يستخدم البروتوكول الموصوف هنا مجموعة سلفية للبنكرياس خلال المراحل 1-4 ، متبوعا ببروتوكول معدل من ورقة نشرت سابقا في عام 2014 (تسمى "بروتوكول R" فيما بعد) خلال المراحل 5-7. يتم تضمين الإجراءات التفصيلية لاستخدام مجموعة السلف البنكرياسي وألواح microwell بقطر 400 ميكرومتر لتوليد مجموعات السلف البنكرياسي ، وبروتوكول R لتمايز الغدد الصماء في شكل تعليق ثابت 96 بئرا ، والتوصيف في المختبر والتقييم الوظيفي للجزر المشتقة من hPSC. يستغرق البروتوكول الكامل 1 أسبوع لتوسيع hPSC الأولي متبوعا ب ~ 5 أسابيع للحصول على جزر hPSC المنتجة للأنسولين. يمكن للأفراد الذين لديهم تقنيات زراعة الخلايا الجذعية الأساسية والتدريب على المقايسات البيولوجية إعادة إنتاج هذا البروتوكول.