A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Abstract
Biology
研究灵长类多能干细胞及其衍生物的跨物种方法对于更好地了解疾病、发育和进化的分子和细胞机制至关重要。为了使灵长类动物诱导的多能干细胞(iPSCs)更容易获得,本文提出了一种从尿源性细胞中产生人和非人灵长类动物iPSCs的非侵入性方法,并使用无饲养层培养方法维持它们。
尿液可以从非无菌环境(例如动物的笼子)中取样,并在原代细胞培养过程中用广谱抗生素混合物处理,以有效减少污染。在尿源性细胞繁殖后,iPSCs通过市售仙台病毒载体系统的改良转导方法产生。第一个iPSC菌落可能在5天后已经可见,最早可以在10天后采摘。使用无酶解离缓冲液进行常规团块传代,支持生成的 iPSC 的多能性超过 50 次传代。
Explore More Videos
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved