Generering og vedligeholdelse af primatinducerede pluripotente stamceller afledt af urin

Tilgange på tværs af arter, der studerer primatpluripotente stamceller og deres derivater, er afgørende for bedre at forstå de molekylære og cellulære mekanismer for sygdom, udvikling og evolution. For at gøre primatinducerede pluripotente stamceller (iPSC'er) mere tilgængelige præsenterer dette papir en ikke-invasiv metode til at generere humane og ikke-menneskelige primat-iPSC'er fra urinafledte celler og deres vedligeholdelse ved hjælp af en feederfri dyrkningsmetode.

Urinen kan udtages fra et ikke-sterilt miljø (f.eks. dyrets bur) og behandles med en bredspektret antibiotikacocktail under primær cellekultur for effektivt at reducere forureningen. Efter formering af de urinafledte celler genereres iPSC'er ved en modificeret transduktionsmetode af et kommercielt tilgængeligt Sendai-virusvektorsystem. Første iPSC-kolonier kan allerede være synlige efter 5 dage og kan tidligst plukkes efter 10 dage. Rutinemæssig klumppasning med enzymfri dissociationsbuffer understøtter pluripotens af de genererede iPSC'er i mere end 50 passager.