Generazione e mantenimento di cellule staminali pluripotenti indotte da primati derivate dall'urina

Gli approcci interspecie che studiano le cellule staminali pluripotenti dei primati e i loro derivati sono cruciali per comprendere meglio i meccanismi molecolari e cellulari della malattia, dello sviluppo e dell'evoluzione. Per rendere le cellule staminali pluripotenti indotte dai primati (iPSC) più accessibili, questo articolo presenta un metodo non invasivo per generare iPSC di primati umani e non umani da cellule derivate dall'urina e il loro mantenimento utilizzando un metodo di coltura senza alimentatore.

L'urina può essere campionata da un ambiente non sterile (ad esempio, la gabbia dell'animale) e trattata con un cocktail antibiotico ad ampio spettro durante la coltura cellulare primaria per ridurre efficacemente la contaminazione. Dopo la propagazione delle cellule derivate dall'urina, le iPSC sono generate da un metodo di trasduzione modificato di un sistema vettoriale del virus Sendai disponibile in commercio. Le prime colonie di iPSC possono essere già visibili dopo 5 giorni e possono essere raccolte dopo 10 giorni al più presto. Il passaggio di routine del grumo con tampone di dissociazione privo di enzimi supporta la pluripotenza delle iPSC generate per più di 50 passaggi.