Generering og vedlikehold av primatinduserte pluripotente stamceller avledet fra urin

Cross-species tilnærminger som studerer primat pluripotente stamceller og deres derivater er avgjørende for å bedre forstå molekylære og cellulære mekanismer for sykdom, utvikling og evolusjon. For å gjøre primatinduserte pluripotente stamceller (iPSCs) mer tilgjengelige, presenterer denne artikkelen en ikke-invasiv metode for å generere humane og ikke-menneskelige primat-iPSCer fra urinavledede celler, og vedlikeholdet av dem ved hjelp av en materfri dyrkingsmetode.

Urinen kan prøvetas fra et ikke-sterilt miljø (f.eks. dyrets bur) og behandles med en bredspektret antibiotikacocktail under primær cellekultur for å redusere forurensning effektivt. Etter forplantning av de urinavledede cellene genereres iPSCs ved en modifisert transduksjonsmetode av et kommersielt tilgjengelig Sendai-virusvektorsystem. Første iPSC-kolonier kan allerede være synlige etter 5 dager, og kan tidligst plukkes etter 10 dager. Rutinemessig klumppassasje med enzymfri dissosiasjonsbuffer støtter pluripotens av de genererte iPSCene i mer enn 50 passasjer.