생체 내에서 처리되는 신경 칼슘의 세포 내 이미징

칼슘(^Ca2+) 이미징은 뉴런 활동을 조사하는 데 주로 사용되어 왔지만, 세포내^Ca2+ 처리가 세포내 신호전달의 중요한 구성 요소라는 것이 점점 더 분명해지고 있습니다. 생체 내에서 세포 내 Ca²⁺ 역학의 시각화는 뉴런이 원래의 온전한 회로에서 연구될 수 있으며, 복잡한 신경계에서 기술적으로 어려운 것으로 입증되었습니다. 선충 Caenorhabditis elegans의 투명성과 비교적 단순한 신경계는 형광 태그 및 지표의 세포 특이적 발현 및 생체 내 시각화를 가능하게 합니다. 이들 중에는 세포질뿐만 아니라 미토콘드리아와 같은 다양한 세포 내 구획에서 사용하도록 변형 된 형광 지표가 있습니다. 이 프로토콜은 개별 수지상 가시 및 미토콘드리아 수준까지 Ca 2+ 역학을 분석할 수 있는 세포 내 분해능으로 생체 내에서 비비율계량 Ca²⁺ 이미징을 가능하게 합니다. 여기서, 상이한 Ca²+ 친화도를 갖는 2개의 이용가능한 유전적으로 암호화된 지표가 단일 쌍의 흥분성 중간 뉴런 (AVA)에서 세포질 또는 미토콘드리아 매트릭스 내의 상대적^Ca2+ 수준을 측정하기 위한 이 프로토콜의 사용을 입증하기 위해 사용된다. 예쁜꼬마선충에서 가능한 유전자 조작 및 종단 관찰과 함께 이 이미징 프로토콜은 Ca²⁺ 처리가 신경 기능과 가소성을 조절하는 방법에 관한 질문에 답하는 데 유용할 수 있습니다.