使用基于光学的系统对水凝胶嵌入的完整小鼠肌纤维进行高通量收缩测量

体外细胞培养是评估细胞过程和测试治疗策略的有力工具。对于骨骼肌，最常见的方法是将肌源性祖细胞分化为未成熟的肌管，或对分离的单个肌纤维进行短期离体培养。体外培养的一个关键好处是保留了复杂的细胞结构和收缩特性。在这里，我们详细介绍了从小鼠中分离完整的指趾短屈肌纤维及其随后的离体培养的实验方案。在该协议中，肌肉纤维嵌入基于纤维蛋白和基底膜基质水凝胶中以固定纤维并保持其收缩功能。然后，我们描述了使用基于光学的高通量收缩力系统评估肌纤维收缩功能的方法。对嵌入的肌纤维进行电刺激以诱导收缩，然后使用基于光学的定量评估其功能特性，例如肌节缩短和收缩速度。将肌纤维培养与该系统相结合，可以高通量测试药物对遗传性肌肉疾病的收缩功能和离体研究的影响。最后，该协议还可以适用于使用活细胞显微镜研究肌肉纤维中的动态细胞过程。