Протокол «ловушка-вакцина-выпуск» для иммунизации скунсов и дополнительных переносчиков бешенства против бешенства

Summary

В этой статье мы представляем протокол для демонстрации безопасных методов ловли-вакцинации-выпуска (TVR) для плотоядных животных, восприимчивых к бешенству.

Abstract

Пероральная вакцинация диких животных против бешенства путем распространения вакцинных приманок широко используется в качестве инструмента борьбы в Европе и Северной Америке. За последние несколько десятилетий успешные программы были нацелены на важные водоемы, включая койотов, лисиц, енотовидных собак и енотов, для профилактики и контроля. Однако другие виды (например, скунсы) или определенные места обитания (например, городские) могут быть менее восприимчивы к пероральной вакцинации, что требует рассмотрения дополнительных стратегий. Ловушка-вакцинация-освобождение (TVR) является одним из альтернативных методов, который влечет за собой использование живых ловушек для поимки целевых диких животных. Ловушки распределяются по сеткам в подходящих, доступных местах обитания. Отловленных животных идентифицируют путем мечения, парентерально вакцинируют инактивированной коммерческой вакциной, определяют пол, состаривают, взвешивают и выпускают на месте отлова. С 2001 года во Флагстаффе, штат Аризона, была обнаружена межвидовая передача вируса бешенства от летучих мышей мезоплотоядным животным, таким как скунсы. В течение последних двух десятилетий TVR использовался в качестве безопасного и эффективного метода профилактики и борьбы с бешенством во время таких событий в этом регионе.

Introduction

Вирус бешенства (RABV) является смертельно опасным зоонозным заболеванием, которое влияет на здоровье человека в глобальном масштабе. Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) сообщает, что ежегодно погибает около 59 000 человек, преимущественно в странах Азии и Африки. Кроме того, 29 миллионов человек ежегодно получают постконтактную вакцинацию из-за укуса животного. Воздействие на популяции диких животных не может быть точно измерено, но популяции диких животных могут испытывать высокие показатели смертности во время вспышек при благоприятных геопространственных условиях. Розатте сообщила, что популяция енота (Procyon lotor) на площади 124 кв. км (48 кв. миль) сократилась примерно на 71% в течение нескольких месяцев после зарегистрированной^{вспышки} RABV.

Контроль и управление RABV имеют важное значение для защиты здоровья человека, домашних животных и уязвимых популяций диких животных. Поскольку все млекопитающие восприимчивы к RABV, со временем RABV адаптировался к нескольким различным видам млекопитающих, которые в настоящее время выступают в качестве резервуарных хозяев. Эти виды-хозяева и связанные с ними варианты обычно населяют определенные географические регионы. В этих регионах происходит распространение инфекции на хозяев, не являющихся резервуарами (межвидовая передача), но в большинстве случаев инфицированные виды, не являющиеся резервуарами, не передают инфекцию другим особям в популяции. Смена хозяина — это редкое событие, при котором вирус успешно адаптировался к новому хозяину. Эти события являются наиболее опасными, так как они могут повлиять на распространение RABV и подорвать любые предпринятые усилия по борьбе с RABV².

В Северной Америке усилия по управлению RABV сосредоточены на нескольких конкретных наземных водоемах дикой природы. Программы пероральной вакцинации против бешенства (ORV) доказали свою эффективность в борьбе с бешенством в больших масштабах. ORV использует использование небольших приманок с воздуха и вручную, которые содержат пероральную вакцину против RABV. Эти приманки распределяются по ландшафту; любые целевые дикие животные, которые сталкиваются с этими пакетами, получают вакцину RABV перорально, когда они их кусают. Использование ORV сыграло важную роль в борьбе с рыжей лисицей (Vulpes vulpes) RABV в Европе³, енотом RABV в Канаде и койотами (Canis latrans) и енотами в Соединенных Штатах⁴. Приманки ORV оказались ценным инструментом в программах управления RABV, поскольку они могут быть внедрены в обширных регионах ландшафта и сократить количество персонала, необходимого для программ управления. Одним из недостатков программы ORV является ее неэффективность в успешной вакцинации видов скунсов. Недостаточное поглощение вакцины из существующих пакетов ORV, по-видимому, является текущим препятствием для эффективности ORV в популяциях диких скунсов в полевых условиях⁵.

Ловушка-вакцинация-высвобождение (TVR) является альтернативным инструментом борьбы с бешенством, который иногда используется одновременно с ORV. Целью TVR является увеличение числа вакцинированных против бешенства лиц в популяции. Поскольку он требует трудоемкого отлова животных и стоит^{дороже, чем} ORV на квадратный километр6, TVR выполняется в гораздо меньших масштабах, чем ORV, и часто применяется в городских районах, где существует много проблем с ORV^.

Ловушка-вакцинация и выпуск скунсов в Соединенных Штатах несколько раз была эффективной в Флагстаффе, штат Аризона. С 2001 года во Флагстаффе наблюдаются неоднократные вспышки большого варианта бурой летучей мыши (Eptesicus fuscus) RABV в популяциях полосатого скунса (Mephitis mephitis)⁸. С 2001 по 2011 год (в ходе нескольких различных усилий TVR, проводимых Министерством сельского хозяйства США, Службой инспекции здоровья животных и растений, Службой дикой природы) 842 животных были отловлены, вакцинированы и выпущены, в том числе 753 полосатых скунса (данные по захвату Службы дикой природы). Каждая попытка останавливала вспышки бешенства летучих мышей у скунсов. В 2021 году это межвидовое явление произошло снова, когда в двух сильно урбанизированных районах Флагстаффа были подтверждены бешеные полосатые скунсы. Служба охраны дикой природы немедленно скоординировала и запустила программу TVR в этих районах для сдерживания вспышки в сотрудничестве с Департаментом здравоохранения Коконино и несколькими государственными учреждениями. Цель данной рукописи – безопасно продемонстрировать шаги в программе TVR, нацеленной на скунсов.

Оборудование, необходимое для отлова и вакцинации, следующее:

Полевое оборудование TVR
Подробный список всего используемого оборудования можно найти в прилагаемом файле Table of Materials . Тем не менее, необходимо внести некоторые уточнения в вопрос об используемых «деревянных вантузах». Это самодельные устройства, состоящие из деревянного дюбеля для рукояти. К торцу дюля крепится кусок фанеры, обрезанный по размерам отверстия ловушки. Поскольку мы использовали ловушки трех разных размеров, мы изготовили плунжеры следующих размеров (6 дюймов x 6 дюймов, 8 дюймов x 8 дюймов, 10 дюймов x 10 дюймов) (Рисунок 1). Кроме того, крышки для ловушек требуются только при работе со скунсом. Материалом крышки ловушки может быть холст, старый брезент или одноразовая пластиковая пленка, как мы использовали.

Средства индивидуальной защиты (СИЗ)
Полевые бригады должны получить предконтактные прививки от бешенства до участия в любой программе TVR. СИЗ, необходимые для работы TVR, включают средства защиты глаз, такие как одноразовый защитный экран, лабораторные очки или защитные очки. Одноразовый комбинезон является лучшей защитой от множества различных летучих соединений, содержащихся в спрее скунса. (Примечание: костюм не требуется при работе с енотом или лисой). Одноразовые нитриловые перчатки защищают от различных химических веществ и жидкостей, а также обеспечивают защиту от слюны и биологических жидкостей, содержащих патогены отловленных животных.

Подготовка и расстановка ловушек
Мы использовали три размера ловушек для живого отлова: маленький (7 дюймов x 7 дюймов x 24 дюйма), средний (9 дюймов x 9 дюймов x 26 дюймов) и большой (10 дюймов x 12 дюймов x 32 дюйма) (рис. 1). Перед тем как ловушки будут развернуты в полевых условиях, их следует тщательно промыть водой с мылом. Ловушки следует оставлять на открытом воздухе от нескольких недель до месяцев, чтобы устранить запах. Пусковые механизмы проверяются и при необходимости ремонтируются перед настройкой. Предупреждающие надписи с надписью «Вектор бешенства» установлены на каждой ловушке с помощью проволоки-ловушки. Дополнительный предупреждающий знак о бешенстве размещен в непосредственной близости от каждой ловушки; Это вторичное предупреждение содержит общую информацию о перехвате и контактную информацию программы. Ловушки размещаются на маршрутах передвижения животных и местах кормления или рядом с ними. Следует выбирать места, которые сводят к минимуму стресс для животного, включая погодные явления и помехи от деятельности человека. Установленное место отлова получает уникальное имя, и местоположение регистрируется в портативном GPS-устройстве.

Protocol

Безопасное обращение с животными и уход за ними, продемонстрированные в этом протоколе, соответствуют стандартам, установленным APHIS Wildlife Services.

1. Протокол вакцинации

1. Подготовка
   1. Наденьте СИЗ, включая лицевые щитки/очки, нитриловые перчатки и комбинезоны.
   2. Извлеките из упаковки пару пронумерованных ушных бирок, чтобы пометить пойманное животное. Запишите номера ушных бирок в техническом описании и поместите их в закрывающийся пластиковый пакет с маркировкой с номером ушной бирки, чтобы они были в безопасности и организованы до тех пор, пока они не будут готовы к развертыванию.
   3. Тихо и спокойно подойдите к ловушке. Если скунсовый скунс был пойман, используйте кусок брезента, мешковины или пластиковой пленки, чтобы накрыть ловушку и защитить себя от любого спрея от скунса.
   4. Осторожно оберните крышку вокруг ловушки и с помощью стального пружинного зажима закрепите ее на ловушке. Для енота или лисы укрытие не требуется.
   5. Осторожно расположите ловушку на ее конце дверцей ловушки вверх (к небу).
2. Вакцинация
   1. Как только пойманное животное переместится на дно ловушки, откройте дверцу и поместите деревянный поршень внутрь ловушки на теле животного.
   2. Слегка надавите на животное, чтобы животное не могло свободно двигаться. Используйте механическую иммобилизацию, чтобы безопасно вакцинировать и пометить животное.
   3. Достаньте вакцину против бешенства из холодильника и наберите правильную дозировку (1 мл) в шприц объемом 3 мл. Поместите ушные бирки в сумку для бутербродов для животного в легкодоступном месте.
   4. Осторожно отодвиньте крышку вокруг ловушки, чтобы найти область для введения вакцины.
   5. Осторожно введите иглу в мышечную ткань животного на задней лапе и плавно нажмите на поршень, чтобы ввести вакцину против бешенства.
   6. Утилизируйте использованный шприц в контейнере для острых предметов.
   7. Расположите ловушку так, чтобы ушки были доступны, и поместите одну металлическую ушную бирку в установочный паз на плоскогубцах.
   8. Расположите открытый конец ушной бирки над ухом и равномерно и осторожно надавите на него, пока ручки плоскогубцев не остановятся. Повторите последовательность на другом ухе.
   9. Установив ловушку на конец, снимите поршень, закройте люк и прикрепите крючок ручного веса к ловушке. Осторожно поднимите ловушку и удерживайте неподвижно. Запишите вес капкана и животного в техническом описании.
   10. Положите ловушку на плоскую поверхность и расположите крышку так, чтобы она больше не оборачивалась вокруг ловушки, а лежала поверх ловушки.
   11. Осторожно оторвите ловушку от земли с помощью ручки и поместите ручное зеркало под ловушку. Используя отражение животного в зеркальном отражении, определите пол животного. Запишите в даташит.
       ПРИМЕЧАНИЕ: Зеркало не обязательно для секса с лисой или енотом.
   12. Оцените возраст животного как взрослого или молодого. Запишите в даташит.
   13. Завершите заполнение технического паспорта. Металлический планшет с местом для хранения лучше всего защищает листы в ненастную погоду и удерживает их на одном месте во время сеанса отлова.
   14. Используйте металлический зажим, чтобы удерживать люк в открытом положении. Медленно отступите и дайте животному выйти из ловушки без давления.
   15. Как только животное выйдет, снова взвесьте пустую ловушку, убедившись, что зажимы и защитная крышка остались с ней. Вычтите этот вес из веса, записанного ранее, чтобы рассчитать вес животного.

Discussion

По оценкам Центров по контролю и профилактике заболеваний, около 55 000 американцев ежегодно получают постконтактную профилактику (ПЭП), при этом средняя стоимость каждого контакта составляет около 3 600 долларов^США. Основными экономическими последствиями, связанными с бешенством, являются затраты на борьбу с болезнью и лечение для предотвращения смертельных случаев среди людей после контакта. Ключом к уменьшению проблем со здоровьем и экономических последствий является успешная вакцинация наземных водоемных видов¹⁰. Программа TVR является инструментом управления для вмешательства в случае вспышек, угрожающих здоровью человека, домашних животных и дикой природы. TVR наиболее эффективен в борьбе с мелкомасштабными вспышками бешенства, поскольку его использование в больших^{ландшафтных} масштабах является очень дорогостоящим и трудоемким 6. Несмотря на эти недостатки, TVR является ценным инструментом борьбы с бешенством, который неоднократно доказывал свою эффективность в остановке распространения болезни путем вакцинации резервуарных видов^11,12. Протокол TVR, показанный в этой рукописи, является ответом на вспышки бешенства в городе Флагстафф, штат Аризона, где с 2001 года наблюдаются неоднократные вспышки большого коричневого RABV в популяциях полосатых скунсов^. Эта программа TVR была основана на исследовании TVR, проведенном компанией Rosatte, в котором скунсы и еноты были внутримышечно вакцинированы против бешенства в столичном Онтарио¹³. В этом протоколе рассматривался вопрос о том, как безопасно и успешно вакцинировать пойманных полосатых скунсов и других мезоплотоядных животных.

Одним из самых важных этапов в этом протоколе является надежная иммобилизация животного. Животное должно быть в безопасности, но сила обездвиживания не должна причинить животному никакого вреда. Надлежащая иммобилизация гарантирует, что животное получит полную дозу вакцины (1 мл), предотвращая отстранение животного во время инъекции. Кроме того, безопасное животное не может кусать и царапать инструменты, используемые для установки ушных бирок. Это помогает снизить стресс для каждого животного, сокращая время, необходимое для обработки каждого животного.

Одной из проблем, с которой мы столкнулись, была вакцинация и маркировка ушей скунсов, пойманных в больших ловушках (10 дюймов x 12 дюймов x 32 дюйма). Этот процесс может быть сложным, так как он дает скунсам больше места для отрыва от стенок ловушки и вне досягаемости инструментов. Эта проблема стала еще более очевидной, когда были пойманы молодые скунсы. Эти ситуации требовали некоторой модификации нашей технологии обработки. В таких ситуациях мы будем использовать деревянный поршень для маленьких ловушек, чтобы поймать скунса в угол ловушки и обработать его сверху через дверное отверстие. Это позволило обработать скунсов, но все равно оказалось сложной задачей.

Мы задокументировали поимку скунсов во всех ловушках трех размеров. Отлов енотов был задокументирован в средних и больших капканах, а серых лисиц — исключительно в больших капканах. Существует тенденция к тому, что некоторые животные привыкают к ловушкам и их часто отлавливают. Постоянное перемещение ловушек на новые места помогает свести к минимуму повторные отловы и дает возможность отлавливать и вакцинировать новых особей на ландшафте.

Одним из ограничений TVR является размер области, которая может быть эффективно обработана. В крупномасштабных операциях по борьбе с бешенством TVR часто используется в сочетании с ORV для охвата больших площадей ландшафта. TVR, сам по себе, охватывает гораздо меньшую территорию и лучше всего используется в городских районах в качестве быстрого реагирования на чрезвычайные ситуации или, в нашем случае, для борьбы со вспышками бешенства в популяциях скунсов. Усилия TVR также могут оказаться дорогостоящими, с оценками $625.00 за км² обработанных¹². Эти затраты могут значительно варьироваться, поскольку большие площади требуют большего количества персонала и оборудования, что впоследствии увеличивает расходы.

В предыдущей работе было установлено, что инокуляция 1 мл вакцины против бешенства была эффективна для стимуляции выработки антител к бешенству у мезоплотоядных животных¹⁴. Есть несколько статей, основанных на TVR, в которых упоминается вакцинация животных 1,12,13,14, но мы не смогли найти ни одной опубликованной статьи, предлагающей подробное объяснение протокола введения вакцины. Таким образом, мы не смогли сравнить протокол, предложенный в этой рукописи, с существующими методами. Материалы и методы, представленные в этой рукописи, позволят полевым бригадам проводить точные и эффективные вакцинации популяций диких животных. Этот протокол доказал свою эффективность и будет продолжать использоваться в текущих и будущих усилиях TVR.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
#8 x 1-1/2 in. R4 Multi-Purpose Star Drive Flat Head Screw (110 per Pack)	Home Depot	96085	Used to attach base to plunger push rod
#8 x 1-1/4 in. #2 Phillips, Wafer-Head Wood Screw (100-Pack)	Home Depot	SD8X1.25-R	Used to attach trap sign to stake
2  in. x 2 in. x 8 ft. Furring Strip Board Lumber	Home Depot	75800593	Push rod for plunger
20 G  x 1.5 " needle	Kendall monoject	8881	Used to vaccinate animal
3 mL syringe	Kendall monoject	513934	Used to vaccinate animal
48 oz. Steel Drilling Hammer	Home Depot	MRF3LB	Used to put trap sign stake into the ground
7-1/4 in. x 140-Tooth OSB/Plywood Circular Saw Blade	Home Depot	A07140A	Blade needed for circular saw to cut plywood
Aluminum Clipboard - Top Opening, Letter	ULINE	S-20173	Used to record and keep datasheets
Circular saw	Home Depot	CSB144LZK	Used to cut wood to make plunger
Cold Packs - 6 oz	ULINE	S-9902	Used to regulate temperature of the vaccine
Dish soap	ULINE	S-9975	Used to clean traps
Dupont Tyvek protective clothing	ULINE	S-11495	Used to protect personnel from skunk spray. Size will be dependent upon size of personnel. You can also use the non-hooded coverall S-9636.
Handheld GPS unit	Garmin	ETrex 32X	Used to record location of trap and captured animals
Handheld mirror 6 in. x 7 in.	Walmart	Equate	Used to sex animal
Headlamp	Home Depot	HDB32EH	To check traps before sunup
Jar of peanut butter	Walmart	40 oz jar	Bait for trapping skunks.
Live trap for skunks	Tomahawk	103	Used to catch skunks
Live trap for skunks and other carnivores	Tomahawk	205; 602	Used to catch skunks and other carnivores
Nitrile gloves	ULINE	S-14179	Used to protect personnel from pathogens. Size and use of powdered or non-powdered will be dependent on personnel choice.
ONE+ 18 V Cordless 3/8 in. Drill/Driver Kit with 1.5 Ah Battery, Charger, Hand Tools, Accessories, and Tool Bag	Home Depot	PCL201K1SB	Used to assemble signs on stakes
Paper Mate Profile 8 pk Ballpoint Pens 1.4 mm Bold Tip Black	Staples	2095460	Used to write on data sheets
Rabies trapping sign 9 in. x 12 in.	FedEx Office	NA	Attach to stake near trap location
Rabies vaccine	Boehringer Ingelheim	Imrab®	1 mL per animal; https://www.boehringer-ingelheim.com/animal-health/companion-animals-products/rabisin-imrab#:~:text=Rabisin%C2%AE%20%2F%20Imrab%C2%AE%20is,signs%20due%20to%20rabies%20infection.
Rabies warning sign 4 in. x 6 in.	FedEx Office	NA	Attach to top of trap
Raccoon and fox ear tag	National Band and Tag Company	1005-3	Ear tags for raccoons and foxes
Raccoon and fox ear tag	National Band and Tag Company	1005s3	Ear tap pliers to attach ear tags to raccoons and foxes
Refresh 6-Pack Lunch Cooler	4imprint.com	155149	Used to carry vaccine in the field
Roll of plastic sheeting 12 ft. x 400 ft.	3M	6723	Used to calm animal and protect personnel
Safety goggles or disposible face shield	ULINE	S-24607	Used to protect personnel face from skunk spray and pathogens.
Sanded Plywood (Common: 1/2 in. x 2 ft. x 4 ft.; Actual: 0.451 in. x 23.75 in. x 47.75 in.)	Home Depot	300896	Base for plunger
Scale 55 lb x 0.5 oz	Brecknell	Model 816965007486	Used to weigh cage and animal
Sharpie Black Fine Tip Permanent Marker 1 pk	Ace Hardware	35010	Used to label sandwich bags
Sharps Container - 1 Quart	ULINE	S-15307	Holding used syringes
Skunk ear tag	National Band and Tag Company	1005-1	Ear tags for skunks
Skunk ear tag applicator	National Band and Tag Company	1005s1	Ear tag pliers to attach ear tags to skunks
Tap water	NA		Used to clean traps
Trap line wire	Minnesota Trap Line Products, INC	11GA-01	Trap wire to attach sign to trap https://www.minntrapprod.com/Snares/departments/577/
Universal Forest 48 in. x 1 in. x 2 in. Wood Grade Stake 24 pk	Ace Hardware	5606413	Stake for trap sign
XM Series 3 in. Capacity Steel Spring Clamp with Handles and Tips, 3-1/3 in. Throat Depth	Home Depot	XM7	Used to attach plastic sheeting to trap or to hold trap door open
Ziploc Sandwich Bags	ULINE	S-23777	Used to hold ear tags